【摘 要】
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目的 研究中药雷公藤甲素(TP)对人髓系白血病细胞系HL-60细胞甲基化状态的影响,并对其去甲基化作用机制进行初步探讨.方法 用0、3.125、6.250、12.500、25.000 nmol/L TP分别处理HL-60细胞24、48 h,采用MTT法检测细胞增殖水平;用流式细胞术检测3.125、6.250nmol/L TP作用HL-60细胞48 h细胞凋亡率及细胞周期变化;用实时荧光定量PCR检
【机 构】
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030001太原,山西医科大学,山西医科大学附属大医院血液科,山西医科大学附属大医院血液科,山西医科大学附属大医院血液科
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目的 研究中药雷公藤甲素(TP)对人髓系白血病细胞系HL-60细胞甲基化状态的影响,并对其去甲基化作用机制进行初步探讨.方法 用0、3.125、6.250、12.500、25.000 nmol/L TP分别处理HL-60细胞24、48 h,采用MTT法检测细胞增殖水平;用流式细胞术检测3.125、6.250nmol/L TP作用HL-60细胞48 h细胞凋亡率及细胞周期变化;用实时荧光定量PCR检测HL-60细胞死亡相关蛋白激酶DAPK-1、甲基转移酶DNMT1、DNMT3B mRNA的表达;用甲基化特异性PCR检测HL-60细胞LINE-1、DAPK-1基因甲基化程度的改变.结果 与对照组相比,不同浓度TP能明显抑制HL-60细胞增殖,呈时间-剂量依赖性(P＜ 0.05,P＜ 0.01);6.250 nmol/L TP作用HL-60细胞48h细胞早期凋亡率与未加药对照组相比明显升高[(9.77±3.52)％对(2.07±1.91)％,P＜0.05];HL-60细胞DAPK-1 mRNA表达水平随TP浓度的增加而增加(P＜0.01),而DNMT1、DNMT3B mRNA表达则明显受抑(P＜0.01);对照组HL-60细胞的LINE-1、DAPK-1基因呈高甲基化状态,经TP作用后LINE-1、DAPK-1基因的甲基化条带减弱,非甲基化条带增强,均呈剂量依赖性.结论 TP可抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是通过下调甲基转移酶基因DNMTl/3B mRNA的表达,降低LINE-1、DAPK-1基因甲基化程度,使DAPK-1基因表达上调实现的。
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作者投稿时，原稿中若有图（表），每幅图表应随内容排人相应段落，并另外将图表中附于文后1份，分别按其在正文中出现的先后次序连续编码。每幅图表应冠有图（表）题。说明性的文字应置于图（表）下方注释中，并在注释中标明图表中使用的全部非公知公用的缩写下词汇的全称。线条图高宽比例以5：7为宜。以计算机制图提供激光打印图样。
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