【摘 要】
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目的 探讨皮层肌动蛋白(cortactin,CTTN)对食管鳞状细胞癌(简称鳞癌)迁移侵袭的作用及分子机制.方法 在人食管鳞癌细胞系EC109、TE1中通过慢病毒转染技术过表达或敲减CTTN;蛋白质印迹法检测细胞间黏附分子-1(ICAM1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达量;通过Transwell侵袭实验评估细胞侵袭力,划痕试验观察细胞迁移能力;应用免疫共沉淀验证与CTTN相互作用的蛋白质.结果 在EC109和TEl细胞中成功过表达或敲减CTTN,并利用嘌呤
【机 构】
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056002河北邯郸,河北工程大学附属医院消化内科;056002河北邯郸,河北工程大学附属医院病理科;冀中能源邢矿总医院内四科
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目的 探讨皮层肌动蛋白(cortactin,CTTN)对食管鳞状细胞癌(简称鳞癌)迁移侵袭的作用及分子机制.方法 在人食管鳞癌细胞系EC109、TE1中通过慢病毒转染技术过表达或敲减CTTN;蛋白质印迹法检测细胞间黏附分子-1(ICAM1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达量;通过Transwell侵袭实验评估细胞侵袭力,划痕试验观察细胞迁移能力;应用免疫共沉淀验证与CTTN相互作用的蛋白质.结果 在EC109和TEl细胞中成功过表达或敲减CTTN,并利用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞.与对照组相比,CTTN过表达组的ICAM1、MMP2、MMP9、VEGF-C表达量显著增高(P值均＜0.01);同时,过表达组的细胞侵袭转移能力较对照组也显著增强[穿膜细胞数(541.0±17.8)个比(230.8±10.9)个,划痕愈合速度(72.8±1.9)％比(42.8±1.6)％,P 值均＜0.001].CTTN 敲减组与对照组相比,ICAM1、MMP2、MMP9、VEGF-C表达量显著降低,细胞侵袭转移能力也显著降低[穿膜细胞数(102.3±4.0)个比(223.8±12.1)个,划痕愈合速度(25.7±1.5)％比(43.5±1.9)％,P值均＜0.001].免疫共沉淀实验证实CTTN与Src存在直接相互作用.结论 CTTN通过与Src相互作用促进食管鳞癌细胞的侵袭和转移.
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