双荧光素酶报告法验证乳腺癌中lncRNA PVT1为let-7c-5p的靶基因

来源 :浙江医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shtour

【摘要】

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目的探索在乳腺癌中长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)是否为let-7c-5p的靶标基因。方法利用生物信息学软件预测PVT1序列上let-7c-5p的结合位点,PCR扩增出PV

【作者】

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张硕沈泳高秀飞谢小红

【机构】

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浙江中医药大学附属第一医院乳腺科

【出处】

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浙江医学

【发表日期】

：

2020年1期

【关键词】

：

let-7c-5p PVT1 双荧光素酶报告法乳腺癌长链非编码RNA 微小RNA let-7c-5pPVT1Dual-luciferase reporter

【基金项目】

：

浙江省自然科学基金项目(LY18H270006)

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目的探索在乳腺癌中长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)是否为let-7c-5p的靶标基因。方法利用生物信息学软件预测PVT1序列上let-7c-5p的结合位点,PCR扩增出PVT1上包含结合位点的部分原序列片段以及敲除结合位点的突变序列片段并连接到pRL-TK载体上,重组成pRL-TK-Pw和pRL-TK-Pm质粒,再与对照质粒pGL3以及let-7c-5p或微小RNA(miRNA)-NC mimics共转染至乳腺癌细胞系MCF-7细胞中。作用48h后,使用双荧光素酶检测试剂

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