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摘要：目的 观察芦根多糖对免疫性肝纤维化大鼠的保肝及抗肝纤维化作用，探讨其抗肝纤维化的机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组及芦根多糖高、中、低剂量组。除正常组外，腹腔注射猪血清诱导大鼠免疫性肝纤维化模型，造模7周后各给药组开始灌胃给予相应药物，正常组及模型组给予等量生理盐水。检测血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活性，丙二醛（MDA）含量及肝组织SOD、GSH-px活力和MDA含量。结果 芦根多糖可降低模型大鼠血清AST、ALT活性，降低血清和肝组织MDA含量，升高血清和肝组织SOD、GSH-px活力。结论 芦根多糖可改善肝纤维化模型大鼠肝功能，减轻纤维化，其机制可能与其保肝降酶、抗脂质过氧化有关。
关键词：芦根多糖；肝纤维化；抗脂质过氧化；大鼠
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）07-0042-02
芦根为禾本科植物芦苇（Phramites communis Trin）的根茎。芦根多糖（Polysaccharide of Rhizoma Phragmitis，PRP）是从芦根中提取的多糖。药理研究表明，PRP有保肝作用，为芦根中抗肝损伤的主要有效部位[1]。本课题组前期研究亦表明，PRP对四氯化碳致化学性肝损伤有保护作用，能抑制肝纤维化的形成过程[2]，但对免疫性肝纤维化作用尚不清楚，因此对其抗免疫性肝纤维化作用及机制作进一步探讨。
1 材料与方法
1.1 动物
清洁级Wistar大鼠60只，雄性，体质量（160±20）g，南京医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（苏）2008- 0004。
1.2 药物与试剂
PRP由本院制剂室从芦根中提取制备，经测定总多糖含量>70%。芦根经本院李立华主任中药师鉴定为禾本科植物芦苇的根茎。临用前将芦根多糖用5‰羧甲基纤维素钠配制成混悬液。秋水仙碱片：西双版纳版纳药业有限公司，批号090811；猪血清：郑州益康生物技术有限公司，批号091002；丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）试剂盒皆购自南京建成生物工程研究所。
1.3 动物分组、造模与给药
60只大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）及PRP大、中、小（420、210、105 mg/kg）剂量组。除正常组外，其余各组均按每只0.5 mL/次腹腔注射猪血清，每周2次，连续15周，复制大鼠免疫性肝纤维化模型[3]。于第7周，随机抽取3只模型大鼠，取肝脏，HE 染色后观察肝组织病理改变，判断造模已成功。然后各给药组开始以1 mL/100 g体质量每日灌胃给予相应药物，以5‰羧甲基纤维素钠溶液为溶媒，正常组、模型组同时灌服等体积溶媒。再连续8周。
1.4 观察指标
1.4.1 血清学指标 大鼠以乌拉坦麻醉，腹主动脉取血，检测血清中ALT、AST、SOD、GSH-px活性和MDA含量。
1.5 统计学方法
3 讨论
血清ALT、AST是反映肝细胞损害的基本指标，肝实质细胞的损害是肝纤维化的启动因素，因此保肝降酶能抑制肝纤维化进程，本实验中PRP能显著降低转氨酶的活性，可见其具有一定的保肝降酶作用。
脂质过氧化物是自由基诱发膜脂质过氧化反应而产生的，MDA是脂质过氧化的终产物。SOD则是清除自由基及体内过氧化物的一种酶，是肝组织自由基清除系统中重要的组成成分。肝纤维化时激活巨噬细胞和中性粒细胞，产生大量自由基，发挥细胞毒性作用，使SOD消耗增加；SOD活性和MDA含量反映此时机体氧应激、脂质过氧化水平[4]，因此SOD和MDA对反映肝功损害程度和肝纤维化的活跃程度具有重要临床价值。本实验中MDA含量在肝组织和血清中，模型组较正常组高，可见模型组较正常组脂质过氧化增强，SOD活性降低，与实测值一致。PRP治疗组在MDA含量和SOD活性方面均较模型组有所改善，说明其可能通过抗脂质过氧化过程而具有保肝、抗肝纤维化作用。
GSH-px在清除细胞内的过氧化氢及过氧化脂质上发挥重要作用，是生物机体内的自由基清除剂。本实验中，PRP治疗组GSH-px活性较模型组显著提高。PRP提高机体SOD、GSH-px活性，不但使机体内抗氧化体系中各种酶协同地防治活性氧的损伤，而且相互间起保护作用。结果表明，PRP对猪血清诱导的免疫性肝损伤有保护作用，能抑制肝纤维化形成；明显降低其MDA的水平，提高降低了的SOD活性，使肝组织病理变化得以改善。其保肝作用机制可能与其保肝降酶、抗脂质过氧化有关。
参考文献：
[1] 张国升，凡明月，彭代银，等.芦根多糖保肝作用研究[J].中国医药学报， 2002，17（7）：416-417.
[2] 李立华，张国升.芦根多糖保肝作用及抗肝纤维化作用的研究[J].安徽中医学院学报，2007，26（5）：32-34.
[3] 张艳，都广礼，陈德兴，等.猪血清致大鼠免疫性肝纤维化的动态观察[J].中国中西医结合消化杂志，2007，15（2）：74-76.
[4] 刘翼，李昌平.氧应激、脂质过氧化及肝细胞凋亡在非酒精性脂肪肝病中的作用[J].西南军医，2008，10（4）：3-6.
（收稿日期：2011-11-18，编辑：华强）
关键词：芦根多糖；肝纤维化；抗脂质过氧化；大鼠
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）07-0042-02
芦根为禾本科植物芦苇（Phramites communis Trin）的根茎。芦根多糖（Polysaccharide of Rhizoma Phragmitis，PRP）是从芦根中提取的多糖。药理研究表明，PRP有保肝作用，为芦根中抗肝损伤的主要有效部位[1]。本课题组前期研究亦表明，PRP对四氯化碳致化学性肝损伤有保护作用，能抑制肝纤维化的形成过程[2]，但对免疫性肝纤维化作用尚不清楚，因此对其抗免疫性肝纤维化作用及机制作进一步探讨。
1 材料与方法
1.1 动物
清洁级Wistar大鼠60只，雄性，体质量（160±20）g，南京医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（苏）2008- 0004。
1.2 药物与试剂
PRP由本院制剂室从芦根中提取制备，经测定总多糖含量>70%。芦根经本院李立华主任中药师鉴定为禾本科植物芦苇的根茎。临用前将芦根多糖用5‰羧甲基纤维素钠配制成混悬液。秋水仙碱片：西双版纳版纳药业有限公司，批号090811；猪血清：郑州益康生物技术有限公司，批号091002；丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）试剂盒皆购自南京建成生物工程研究所。
1.3 动物分组、造模与给药
60只大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）及PRP大、中、小（420、210、105 mg/kg）剂量组。除正常组外，其余各组均按每只0.5 mL/次腹腔注射猪血清，每周2次，连续15周，复制大鼠免疫性肝纤维化模型[3]。于第7周，随机抽取3只模型大鼠，取肝脏，HE 染色后观察肝组织病理改变，判断造模已成功。然后各给药组开始以1 mL/100 g体质量每日灌胃给予相应药物，以5‰羧甲基纤维素钠溶液为溶媒，正常组、模型组同时灌服等体积溶媒。再连续8周。
1.4 观察指标
1.4.1 血清学指标 大鼠以乌拉坦麻醉，腹主动脉取血，检测血清中ALT、AST、SOD、GSH-px活性和MDA含量。
1.5 统计学方法
3 讨论
血清ALT、AST是反映肝细胞损害的基本指标，肝实质细胞的损害是肝纤维化的启动因素，因此保肝降酶能抑制肝纤维化进程，本实验中PRP能显著降低转氨酶的活性，可见其具有一定的保肝降酶作用。
脂质过氧化物是自由基诱发膜脂质过氧化反应而产生的，MDA是脂质过氧化的终产物。SOD则是清除自由基及体内过氧化物的一种酶，是肝组织自由基清除系统中重要的组成成分。肝纤维化时激活巨噬细胞和中性粒细胞，产生大量自由基，发挥细胞毒性作用，使SOD消耗增加；SOD活性和MDA含量反映此时机体氧应激、脂质过氧化水平[4]，因此SOD和MDA对反映肝功损害程度和肝纤维化的活跃程度具有重要临床价值。本实验中MDA含量在肝组织和血清中，模型组较正常组高，可见模型组较正常组脂质过氧化增强，SOD活性降低，与实测值一致。PRP治疗组在MDA含量和SOD活性方面均较模型组有所改善，说明其可能通过抗脂质过氧化过程而具有保肝、抗肝纤维化作用。
GSH-px在清除细胞内的过氧化氢及过氧化脂质上发挥重要作用，是生物机体内的自由基清除剂。本实验中，PRP治疗组GSH-px活性较模型组显著提高。PRP提高机体SOD、GSH-px活性，不但使机体内抗氧化体系中各种酶协同地防治活性氧的损伤，而且相互间起保护作用。结果表明，PRP对猪血清诱导的免疫性肝损伤有保护作用，能抑制肝纤维化形成；明显降低其MDA的水平，提高降低了的SOD活性，使肝组织病理变化得以改善。其保肝作用机制可能与其保肝降酶、抗脂质过氧化有关。
参考文献：
[1] 张国升，凡明月，彭代银，等.芦根多糖保肝作用研究[J].中国医药学报， 2002，17（7）：416-417.
[2] 李立华，张国升.芦根多糖保肝作用及抗肝纤维化作用的研究[J].安徽中医学院学报，2007，26（5）：32-34.
[3] 张艳，都广礼，陈德兴，等.猪血清致大鼠免疫性肝纤维化的动态观察[J].中国中西医结合消化杂志，2007，15（2）：74-76.
[4] 刘翼，李昌平.氧应激、脂质过氧化及肝细胞凋亡在非酒精性脂肪肝病中的作用[J].西南军医，2008，10（4）：3-6.
（收稿日期：2011-11-18，编辑：华强）