【摘 要】
：
目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)促进精原干细胞(spermatogonial stem cells，SSCs)增殖作用的分子机制。方法2012年1–12月合成针对GDNF基因的多个干扰性小RNA(small interfering RNA，siRNA)，以慢病毒为载体构建GDNF的慢病毒质粒，转染由
【机 构】
：
550002 贵阳，贵州省人民医院泌尿外科 贵州省肾脏与泌尿疾病研究所,550002 贵阳，贵州省人民医院泌尿外科 贵州省肾脏与泌尿疾病研究所,550002 贵阳，贵州省人民医院泌尿外科 贵州省肾脏与
论文部分内容阅读
目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)促进精原干细胞(spermatogonial stem cells，SSCs)增殖作用的分子机制。
方法2012年1–12月合成针对GDNF基因的多个干扰性小RNA(small interfering RNA，siRNA)，以慢病毒为载体构建GDNF的慢病毒质粒，转染由日龄5～7 d SPF级健康雄性昆明小鼠睾丸组织分离出的SSCs，筛选出GDNF基因干扰效率最高的SSCs作为实验组，以GDNF基因未干扰的SSCs作为对照组。酶联免疫法分别测定两组SSCs转染后第1～4天的吸光度A值，以比较两组的增殖率。流式细胞仪检测两组SSCs的凋亡率。逆转录PCR法检测两组SSCs中GDNF、受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases，RTKs)、Fyn和局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase，FAK)的mRNA表达。
结果实验组转染第1～4天的吸光度A值分别为0.45±0.02、0.68±0.03、1.12±0.03、2.24±0.04，对照组分别为0.46±0.03、0.73±0.02、1.32±0.05、1.15±0.06，第3、4天两组数据比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组SSCs凋亡率分别为(25.43±1.91)%和(5.61±0.16)%，差异有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组SSCs中GDNF、RTKs、Fyn、FAK的mRNA表达率分别为(12.32±1.22)%和(54.25±1.34)%、(16.24±1.35)%和(45.35±1.37)%、(18.32±1.34)%和(38.37±1.55)%、(20.04±1.65)%和(43.27±1.28)%，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论GDNF通过上调RTKs、Fyn和FAK的表达对SSCs的增殖起促进作用。
其他文献
目的分析应用游离股前外侧皮瓣(anterolateral thigh, ALT)修复下咽环形缺损的近期效果。方法回顾性分析2012年3月至2014年9月，设计带观察窗皮岛的游离股前外侧皮瓣修复收治于中山大学肿瘤防治中心头颈外科和汕头大学医学院附属肿瘤医院头颈外科的22例下咽环形缺损患者的病历资料。通过观察近期修复效果总结该技术的要点、优势和并发症。结果环形下咽缺损的长度7～9cm。切取的ALT皮瓣
目的探讨伴有眩晕/头晕症状的突发性聋(以下简称突聋)患者的临床特点和药物治疗效果。方法采用前瞻性、随机、单盲法进行临床多中心研究，收集年龄18～65周岁，病程2周以内并未经任何相关医疗处理的突发性聋患者，按照听力曲线分为低中频下降型、中高频下降型、平坦下降型和全聋型四种类型。每种类型分别采用四种不同的治疗方案，根据统一设计的随机表，随机选取其中一种方案进行治疗。随访4周，对伴有眩晕/头晕症状的突聋
目的分析探讨家族性甲状腺乳头状癌(familial papillary thyroid carcinoma, FPTC)与散发性甲状腺乳头状癌(sporadic papillary thyroid carcinoma, SPTC)的临床病理特征。方法回顾性分析2008年1月至2014年8月辽宁省肿瘤医院诊治的7个家系20例FPTC患者的临床病理资料，按比例随机抽取同期治疗的85例SPTC患者临床病
目的探讨突发性聋预后的相关因素。方法采用国际通用的标准化临床研究方法，统一设计、统一方案进行前瞻性临床多中心研究。2007年8月至2011年10月全国33家医院共收集符合入组条件(年龄在18～65周岁之间，病程在2周以内，未经任何相关医疗处理)的单侧突发性聋患者1 024例，其中男性492例(48.05%)，女性532例(51.95%)；年龄为19～65岁，平均(41.2±12.8)岁。将患者按照
目的总结头颈部原始神经外胚层肿瘤的临床特征、诊断及治疗方法。方法回顾性分析北京协和医院耳鼻咽喉科2004年7月至2014年6月收治的5例原发于头颈部的外周原始神经外胚层肿瘤患者的临床资料。结果5例患者中1例病变局限于颞部，采取肿瘤根治性切除手术，术后给予放射治疗，随访24个月无复发。3例病变范围广泛，分别侵及上颌骨、颞下窝、面颊部等结构，3例患者均经活检明确诊断，其中1例采取术前放疗＋肿瘤根治性切
目的研究锁骨上岛状皮瓣修复头颈部术后缺损的临床应用。方法回顾性分析2013年5月至2014年12月，中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院头颈外科应用带蒂锁骨上岛状皮瓣修复头颈部肿瘤手术缺损10例患者的病历资料，其中下咽癌缺损修复6例，舌癌修复2例，口底癌1例，颈段食管癌1例。皮瓣面积(5～8)cm×(6～12)cm。结果7例皮瓣全部存活，1例全部坏死，2例部分坏死，其他并发症包括咽瘘和伤口感染各1
目的总结分析食管异物严重并发症的临床特点，探讨其治疗策略和防治方法，为临床治疗提供参考。方法对2004年7月至2014年7月收治的食管异物合并严重并发症的44例患者进行回顾性分析，分析其异物类型、发病时间、并发症类型及治疗方法等。结果十年间共收治486例食管异物患者，其中合并严重并发症的共44例(9.05%)。44例中的异物种类以动物类为主，共34例(77.3%)；患者就诊时发病时间2～40 d，
目的探讨采用带蒂憩室壁修复重建尿道成形术后狭窄段尿道的疗效。方法2007年1月至2012年10月收治6例尿道成形术后患儿，年龄12～45个月，平均(28±16)个月。其中尿道下裂术后5例，尿道上裂术后1例。6例术后均出现尿道狭窄导致尿道憩室形成，尿道憩室持续时间平均6个月。自然尿流率3.1～7.3 ml/s，平均(5.1±1.4) ml/s。均经尿道膀胱镜及排尿性膀胱尿路造影检查明确憩室远端尿道狭