【摘 要】
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目的 探讨体外分离与纯化成人胰岛细胞的方法与可行性,为胰岛细胞移植治疗1型糖尿病提供大量高质量的胰岛细胞.方法 获取的成人胰腺组织称重后,采用Ⅴ型胶原酶消化法分离；再用Ficoll间断密度梯度离心纯化法纯化；在DTZ染色显微镜下,评价胰岛细胞的数量、纯度；并用体外培养、放射免疫测定胰岛素法鉴定胰岛细胞活性.结果 成人胰腺经胶原酶消化分离后,胰岛平均收获量(3 600 ±447)个/g胰腺；Fico
【机 构】
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550001贵阳医学院附属医院肝胆外科,550001贵阳医学院附属医院肝胆外科
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目的 探讨体外分离与纯化成人胰岛细胞的方法与可行性,为胰岛细胞移植治疗1型糖尿病提供大量高质量的胰岛细胞.方法 获取的成人胰腺组织称重后,采用Ⅴ型胶原酶消化法分离；再用Ficoll间断密度梯度离心纯化法纯化；在DTZ染色显微镜下,评价胰岛细胞的数量、纯度；并用体外培养、放射免疫测定胰岛素法鉴定胰岛细胞活性.结果 成人胰腺经胶原酶消化分离后,胰岛平均收获量(3 600 ±447)个/g胰腺；Ficoll间断密度梯度离心纯化后,胰岛平均收获量(2 140±207)个/g胰腺,纯度＞70％；成人胰岛细胞培养2、4、6d后,测定其培养液中基础胰岛素浓度(mIU·L-1·100-1)分别为(3.302±1.63)、(3.504±1.10)、(2.921±1.13).结论 胶原酶消化法、Ficoll间断密度梯度离心纯化法分离纯化成人胰岛是有效的方法。
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