大鼠胰岛细胞的分离纯化及培养

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目的探讨大鼠胰岛细胞分离纯化和培养的方法.方法采用胰导管逆行灌注Hanks液分离成年大鼠胰岛,V型胶原酶消化,不连续密度梯度Ficoll 400纯化胰岛.用台盼蓝和双硫腙染色检测胰岛活性和纯度,葡萄糖刺激胰岛素释放试验检测胰岛功能.结果胰岛细胞的收获量为540±150个胰岛/胰腺,活性>90%,纯度>90%,高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激的2倍多.结论胰导管灌注Hanks液,V型胶原酶消化和不连续密度梯度葡聚糖纯化胰岛,可以获取数量多,活性和纯度好的胰岛.
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