【摘 要】
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目的:探讨黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用及其可能作用机制。方法:采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）方法筛选H9c2细胞培养的黄芪注射液浓度；H9c2细胞分为正常对照组、AngⅡ模型组、AngⅡ+黄芪注射液组。采用实时定量聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测3组H9c2细胞电压依赖性阴离子通道1（VDAC1）、线粒体融合蛋白2（Mfn2）及分子伴侣葡萄糖调
【机 构】
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北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部和北京市重点实验室
【基金项目】
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北京中医药大学新奥奖励基金课题（No.2017-XA-JLJJ-012）；
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目的:探讨黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用及其可能作用机制。方法:采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）方法筛选H9c2细胞培养的黄芪注射液浓度；H9c2细胞分为正常对照组、AngⅡ模型组、AngⅡ+黄芪注射液组。采用实时定量聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测3组H9c2细胞电压依赖性阴离子通道1（VDAC1）、线粒体融合蛋白2（Mfn2）及分子伴侣葡萄糖调节蛋白75（GRP75）mRNA的表达；蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测VDAC1、Mfn2、GRP75的蛋白表达；Fura-2 AM法测定细胞内Ca2+浓度变化；用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:黄芪注射液在浓度为0.125%时对细胞的促增殖作用最为显著。与正常对照组比较，AngⅡ模型组Mfn2、GRP75 mRNA表达水平明显增加（P＜0.05）,AngⅡ+黄芪注射液组Mfn2、GRP75 mRNA表达低于AngⅡ模型组（P＜0.05或P＜0.01）,而3组VDAC1 mRNA表达比较差异无统计学意义（P＞0.05）。与正常对照组比较，AngⅡ模型组VDAC1、Mfn2和GRP75的蛋白表达明显增加（P＜0.05或P＜0.01）,AngⅡ+黄芪注射液组VDAC1、Mfn2、GRP75的蛋白表达低于AngⅡ模型组（P＜0.01）。与正常对照组比较，AngⅡ模型组细胞钙含量、细胞凋亡率明显增加（P＜0.05或P＜0.01）,AngⅡ+黄芪注射液组细胞钙含量、细胞凋亡率低于AngⅡ模型组（P＜0.01）。结论:黄芪注射液能够抑制血管紧张素Ⅱ诱导的H9c2心肌细胞凋亡，其机制可能与其调节VDAC1、Mfn2和GRP75等MAM结构蛋白表达和影响细胞内钙平衡有关。
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