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目的自行设计并验证SMAD基因家族PCR引物,探讨应用上述引物进行RT-PCR检测SMAD基因在非小细胞肺癌中表达的可行性。方法自主设计并验证SMAD基因家族SMAD1~SMAD8特异引物,确定SMAD1-1、SMAD2-1、SMAD3-1、SMAD4-2、SMAD5-1、SMAD6-1、SMAD7-1、SMAD8-2引物的扩增效率更高、特异性更强。采用RT-PCR技术检测SMAD1~SMAD8在人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B,肺腺癌细胞系A549、H1299,肺鳞癌细胞系SK-MES-1中的表达变化,引物为SMAD1-1、SMAD2-1、SMAD3-1、SMAD4-2、SMAD5-1、SMAD6-1、SMAD7-1、SMAD8-2。结果以正常支气管上皮BEAS-2B细胞中SMAD1表达量为基准(校正RQ约为1),SMAD2相对表达量为6.590±0.459、SMAD3为10.977±0.312、SMAD4为4.651±0.115、SMAD5为16.762±0.389、SMAD6为3.248±0.108、SMAD7为2.007±0.012、SMAD8为1.144±0.103,均较SMAD1表达升高,其中SMAD5表达最高,SMAD3次之。SMAD2、SMAD4、SMAD5、SMAD6、SMAD7、SMAD8在肺腺癌A549、H1299细胞及肺鳞癌SK-MES-1细胞中的表达均低于人正常支气管上皮BEAS-2B细胞;在H1299、SK-MES-1细胞中SMAD1表达高于BEAS-2B和A549细胞,且在A549细胞中SMAD1表达低于BEAS-2B细胞;在SK-MES-1细胞中SMAD3表达升高,且在H1299、A549细胞中SMAD3表达较BEAS-2B细胞下降;在H1299细胞中SMAD2、SMAD6、SMAD7表较其他三种细胞均下降;各细胞间比较P<0.05或<0.01。结论成功自主设计SMAD基因家族特异引物,并用于检测非小细胞肺癌中SMAD基因表达;SMAD5可能参与了肺癌的发生、发展,SMAD3可能与上皮相关性疾病相关。