【摘 要】
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目前吡咯喹啉醌（Pyrroloquinoline quinone,PQQ）在大肠杆菌中的异源合成主要以质粒为表达载体进行，但是质粒载体难以进行合成途径多基因表达的系统优化，并且容易造成发酵不稳定。作者以大肠杆菌为底盘生物，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，在基因组水平系统优化PQQ的合成。将来源于Gluconobacter oxydans 621H的操纵子pqqABCDE引入底盘大肠杆菌，并
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金项目（21808168）；
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目前吡咯喹啉醌（Pyrroloquinoline quinone,PQQ）在大肠杆菌中的异源合成主要以质粒为表达载体进行，但是质粒载体难以进行合成途径多基因表达的系统优化，并且容易造成发酵不稳定。作者以大肠杆菌为底盘生物，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，在基因组水平系统优化PQQ的合成。将来源于Gluconobacter oxydans 621H的操纵子pqqABCDE引入底盘大肠杆菌，并进一步通过优化合成途径基因表达强度，敲除大肠杆菌自身抑制基因及强化PQQ的胞内需求与胞外转运等，获得了一株能够高效合成PQQ的工程菌，摇瓶发酵72 h时产量达到86.3 mg/L。以大肠杆菌为底盘构建PQQ高效合成途径的工作能够为后续以其他底盘生物生产PQQ及相关代谢产物提供借鉴。
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