m6A RNA甲基转移酶METTL3对肠癌细胞上皮间质转化及侵能力的影响

来源 :现代生物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:silvercup
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨METTL3对肠癌细胞上皮间质转化及侵袭能力的影响.方法:TGFβ诱导肠癌细胞HCT116和SW480发生上皮间质转化;细胞划痕实验和Transwell-Matrigeal穿膜试验分别检测细胞转移侵袭能力;实时荧光定量PCR检测靶基因转录水平;siRNA干扰技术敲减肠癌细胞METTL3水平.结果:细胞划痕修复实验表明:TGFβ诱导组相对愈合面积与对照组相比显著增大(P<0.0001),而TGFβ+敲减METTL3联合组处理组相对愈合面积与TGFβ诱导组相比显著减少(P<0.0001).Transwell-Matrigeal细胞穿膜试验表明:TGFβ诱导组穿膜细胞数较对照组细胞显著增多(P<0.0001),而TGFβ+敲减METTL3联合组处理组与TGFβ诱导组相比显著减少.TGFβ诱导组可显著诱导肠癌细胞发生上皮间充质转化,即增加核心转录因子Snail1和ZEB1水平,减低CDH1及上调Vimentin(VIM)水平,METTL3表达随TGFβ处理时间逐步上调.TGFβ+敲减METTL3联合组较TGFβ诱导组ZEB1和Snail1转录水平显著减低.结论:METTL3在TGFβ介导肠癌细胞EMT中起到关键作用,敲减METTL3可削弱肠癌细胞转移和侵袭能力,靶向抑制METTL3可能成为干预结直肠转移的重要分子靶点.
其他文献
目的 探究临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant klebsiella pneumoniae,CRKP)产生的相关危险因素,剖析引起耐药菌株增加的关键点,以期对抑制CRKP的产生提供重要信息.方法 选取2014~2020年陕西省人民医院CRKP检出率快速上升期患者病例资料,对比同期检出的碳青霉烯类敏感的肺炎克雷伯菌患者病例资料,分析产生CRKP的危险因素,并统计同期抗生素的消耗量以验证抗生素的使用与CRKP检出率的相关性.结果 2014~2020年CRKP检出率分别为9.4
目的 分析北京市海淀区食源性腹泻患者致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的感染状况、型别分布和耐药情况,为致泻大肠埃希氏菌的防控和临床合理用药提供科学依据.方法 对2015~2019年海淀区食源性疾病监测哨点医院送检的1810份腹泻患者粪便标本直接划线接种在麦康凯培养基上培养,挑取可疑菌落进行生化鉴定、毒力基因测定,对确认为致泻大肠埃希氏菌的菌株进行药敏检测.结果 1810份粪便标本中检出致泻大肠埃希氏菌214株,检出率为11.8%,各年度的检出率差异有
目的:探讨干扰素诱导基因IFIT3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞生物学功能和化疗耐药性的影响.方法:本研究通过qRT-PCR或Western blot检测了30例膀胱移行细胞癌患者的肿瘤组织和配对正常癌旁组织标本以及人膀胱癌细胞系T24及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中IFIT3的表达水平.通过浓度递增法构建顺铂(DDP)耐药T24细胞(T24/DDP),然后对细胞转染靶向IFIT3的siRNA(si-IFIT3)及阴性对照(si-NC).将细胞分为4组,分别为T24-si-NC组、T24-si-I
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是长度大于200nt的非编码RNA,其作用机制涉及染色质重塑、DNA转录及转录后修饰、蛋白翻译及翻译后调节,与免疫性疾病关系密切.CD4+T淋巴细胞在适应性免疫反应中发挥重要调控作用,体内的CD4+T淋巴细胞亚群相互配合维持免疫平衡.CD4+T淋巴亚群的比例失调,可能导致免疫失衡,甚至引起免疫性疾病.该文主要阐述lncRNA及其在CD4+T淋巴细胞的增殖分化和免疫性疾病中的调控作用.
目的 设计风险质量控制方案应用于实验室甲状腺功能项目测定的质量控制(Quality Control,QC)中,并与传统QC方法比较.方法 首先评估实验室甲状腺功能五项的西格玛值(σ),基于风险质量控制策略设计QC方案.方案中:促甲状腺激素(TSH)和游离三碘甲状原氨酸(FT3)的质控规则采用13s,N2;游离甲状腺素(FT4)采用13s/22s/R4s,N2;三碘甲状原氨酸(T3)采用13s/22s/R4s/41s,N4;甲状腺素(T4)采用13s/22s/R4s/41s/6x,N6.QC事件频率为每40
目的:研究CHRNA5亚基突变对尼古丁受体功能的影响.方法:通过RT-PCR克隆CHRNA5基因片段,并通过重叠延伸PCR方法对CHRNA5亚基基因定点突变,从而构建CHRNA5突变型及野生型表达载体,然后转染至HEK293T细胞中,检测其基因表达.并将其分别与CHRNA3和CHRNB4共转至HEK293T细胞中,检测三质粒共转后的基因表达;通过采用尼古丁持续灌流细胞10 min,然后检测细胞内钙离子内流峰值的变化情况,接下来检测突变对转染后细胞活力的影响.结果:构建的CHRNA5表达载体在转染HEK29
目的 探讨miR-452-3p在脓毒症并发急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患儿中的表达及其临床意义.方法 选取2018年1月~2020年12月海口市妇幼保健院收治的脓毒症并发AKI患儿106例,根据生存情况分为生存组(n=71)和死亡组(n=35),检测两组血清miR-452-3p,中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及肾损伤分子-1(KIM-1)水平.应用多因素Logistic回归分析AKI患儿发生死亡的危险因素.绘制ROC曲线分析miR-452-3p,NGAL及KI
目的:探讨SOCE对百草枯(PQ)致肺纤维化过程的具体调控作用.方法:体外培养肺泡上皮A549细胞,设置分组为对照组、PQ组和PQ+SKF96365组.对照组不作任何处理;PQ组给予800 μM的PQ溶液处理细胞24 h;PQ+SKF96365组先加入10μM的SKF96365预处理细胞2h,然后再加800 μM PQ处理24 h.免疫荧光检测PQ染毒后SOCE相关蛋白的活化和胞内分布、NFATc1的表达和入核情况.清洁级小鼠40只,随机分为空白对照组、PQ组、SKF96365组和PQ+SKF96365组
目的:研究胶质瘤来源外泌体中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对胶质瘤干细胞形成的影响及其意义.方法:使用外泌体提取试剂盒提取原代胶质母细胞瘤来源外泌体,通过透射电子显微镜、纳米粒度电位仪和Western blotting对外泌体进行鉴定;采用Western blotting检测外泌体中HMGB1的表达量;通过qRT-PCR、Western blotting、克隆球计数检测外泌体对胶质瘤干细胞形成的影响;siRNA敲低HMGB1的表达水平,并通过qRT-PCR、Western blotting、克隆球计数检
目的:探讨不同介入时间和不同疗程高压氧治疗对脑出血大鼠动物学行为及促血管新生因子表达的影响.方法:240只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、高压氧组,每组各80只.采用胶原酶诱导建立脑出血大鼠模型,建模成功后根据高压氧介入时间分为6h介入组、1d介入组、2d介入组、3d介入组等亚组.分别治疗1周、2周、3周、4周,采用Longa评分法、平衡木评分法、Berderson评分法评估大鼠动物学行为,采用qRT-PCR检测大鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达.结