【摘 要】
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目的:探讨SOCE对百草枯(PQ)致肺纤维化过程的具体调控作用.方法:体外培养肺泡上皮A549细胞,设置分组为对照组、PQ组和PQ+SKF96365组.对照组不作任何处理;PQ组给予800 μM的PQ溶液处理细胞24 h;PQ+SKF96365组先加入10μM的SKF96365预处理细胞2h,然后再加800 μM PQ处理24 h.免疫荧光检测PQ染毒后SOCE相关蛋白的活化和胞内分布、NFATc1的表达和入核情况.清洁级小鼠40只,随机分为空白对照组、PQ组、SKF96365组和PQ+SKF96365组
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院急诊危重病科 上海201620;上海交通大学附属第一人民医院临床转化研究院 上海201620
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目的:探讨SOCE对百草枯(PQ)致肺纤维化过程的具体调控作用.方法:体外培养肺泡上皮A549细胞,设置分组为对照组、PQ组和PQ+SKF96365组.对照组不作任何处理;PQ组给予800 μM的PQ溶液处理细胞24 h;PQ+SKF96365组先加入10μM的SKF96365预处理细胞2h,然后再加800 μM PQ处理24 h.免疫荧光检测PQ染毒后SOCE相关蛋白的活化和胞内分布、NFATc1的表达和入核情况.清洁级小鼠40只,随机分为空白对照组、PQ组、SKF96365组和PQ+SKF96365组.PQ组及PQ+SKF96365组给予百草枯(20 mg/kg)一次性腹腔注射,对照组给予等量生理盐水;SKFS96365组及PQ+SKF96365组每天腹腔注射一次10 mg/kg的SKF96365溶液,持续3天,行HE染色、Masson染色观察肺组织病理状态改变以及胶原纤维的变化情况.结果:与正常组相比,PQ染毒组STIM1蛋白活化出现寡聚化现象并且ORAI1、TRPC1膜定位显著;PQ引起细胞质内NFATc1信号向细胞核内转移,密度差异具有统计学意义(P＜0.01),使用SOCE抑制剂后NFATc1信号减弱向细胞质内转移(P＜0.01).与对照组相比,PQ中毒的小鼠肺泡结构被破坏,肺间质大量胶原纤维沉积;与PQ组相比,PQ+SKF96365组肺泡结构相对完整并且间质胶原纤维沉积减少.结论:PQ中毒可活化SOCE并通过增加NFAT入核激活下游转录信号,促进肺纤维化的发生.
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