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目的
应用Ion Torrent半导体测序技术建立血友病A(HA)的F8基因致病突变检测方法并探讨其临床应用价值。
方法方法学建立。应用长距离PCR(LD－PCR)对9例HA患者进行F8基因22号内含子倒位和1号内含子倒位检测，倒位阴性患者应用Ion Torrent半导体测序技术检测F8基因致病突变，对发现的致病突变进行Sanger测序验证。对8个家系中11例女性受检者进行HA携带者检测，并对其中1例孕妇进行胎儿产前基因检测。
结果患者检测发现4例错义突变(c.1331A>C, c．1648C>T, c．6506G>A, c．6544C>T)，2例移码突变(c.2393_2394insT, c．6320delG)，1例剪接突变(IVS5＋5G>A)，1例无义突变(c.43C>T)，1例内含子22倒位突变。在11例女性受检者中，10例为携带者，1例不携带母源致病突变。对1例患病高风险胎儿进行产前基因检测，结果表明胎儿未遗传母亲致病突变。Sanger测序验证结果证实8个突变位点真实存在，与高通量测序结果一致。
结论成功建立了基于Ion Torrent半导体测序技术检测F8基因突变的方法，该方法检测周期短、通量大，是F8基因突变筛查的有效方法。(中华检验医学杂志，2016, 39：496－500)