观察miR－133b在食管鳞癌中的表达，并探讨其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭能力的影响及分子机制。
方法采用实时荧光定量PCR方法检测63例食管鳞癌组织及对应的癌旁组织、食管鳞癌细胞(Eca109、EC9706、EC1、TE1、KYSE70)和正常食管上皮细胞Het－1A中miR－133b的表达。将miR－133b类似物、miR－133b抑制剂及阴性对照转染TE1细胞，分别采用细胞计数试剂盒8(CCK－8)法和Transwell小室实验检测miR－133b对TE1细胞增殖和侵袭能力的影响。采用TargetScan和miRDB在线软件预测miR－133b的靶基因，并利用双荧光素酶报告载体证实其潜在的靶基因。采用Western blot方法检测miR－133b过表达对转胶蛋白2(TAGLN2)及上皮－间充质转化(EMT)相关蛋白上皮型钙黏附素(E－cadherin)、神经型钙黏附素(N－cadherin)、Snail、Slug和波形蛋白(Vimentin)表达的影响。
结果63例食管鳞癌组织miR－133b的相对表达水平为0.295±0.040，显著低于正常癌旁组织(1.002±0.011，P<0.001)。miR－133b mRNA的表达与食管鳞癌分期、淋巴结转移和预后均有关。食管鳞癌细胞Eca109、EC9706、EC1、TE1和KYSE70中miR－133b的相对表达水平分别为0.679±0.031、0.391±0.008、0.236±0.016、0.031±0.005和0.099±0.020，均显著低于正常食管上皮细胞Het－1A(1.005±0.016，均P<0.001)。miR－133b类似物转染能上调TE1细胞中的miR－133b水平达6.199±0.627，并抑制TE1细胞的增殖和侵袭能力，而miR－133b抑制剂转染能下调TE1细胞中的miR－133b水平至0.182±0.023，并增强TE1细胞的增殖和侵袭能力。最为显著的是，TAGLN－3′UTR－WT转染的细胞中，miR－133b类似物转染组的相对荧光素酶的活性(0.320±0.018)显著低于阴性对照组(1.010±0.036，P<0.001)；而TAGLN－3′UTR－MUT转染的细胞中，miR－133b类似物转染组和阴性对照组的相对荧光素酶活性分别为1.019±0.056和1.008±0.021，差异无统计学意义(P>0.05)。miR－133b上调能显著抑制食管鳞癌TE1细胞中TAGLN2蛋白的表达，并且上调E－cadherin的表达，下调N－cadherin、Snail、Slug和Vimentin的表达。
结论miR－133b可能通过调控TAGLN2的表达在食管鳞癌细胞的增殖和侵袭中发挥作用，可能成为食管鳞癌潜在的分子治疗靶点。