【摘 要】
：
目的 研究miR-335-5p对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响及其机制.方法 用浓度为50 mg/ml的ox-LDL培养基培养HA-VSMC细胞,作为ox-LDL处理组,以不添加ox-LDL培养的细胞作为对照(Con)组;设置miR-NC组,miR-335-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-335-5p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-335-5p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-GRK4组、ox-LDL+miR-335-5p+pcDN
【机 构】
：
武汉市第三医院老年病科,湖北 武汉 430060;武汉市第五医院中医科
论文部分内容阅读
目的 研究miR-335-5p对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响及其机制.方法 用浓度为50 mg/ml的ox-LDL培养基培养HA-VSMC细胞,作为ox-LDL处理组,以不添加ox-LDL培养的细胞作为对照(Con)组;设置miR-NC组,miR-335-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-335-5p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-335-5p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-GRK4组、ox-LDL+miR-335-5p+pcDNA组、ox-LDL+miR-335-5p+pcDNA-GRK4组.qRT-PCR检测miR-335-5p和GRK4 mRNA表达;Western印迹检测蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.结果 ox-LDL能促进HA-VSMC细胞中GRK4表达,抑制miR-335-5p表达,诱导炎症因子TNF-α、IL-1β释放(P<0.05).过表达miR-335-5p和抑制表达GRK4炎症因子TNF-α、IL-1β释放减少,细胞凋亡率降低.miR-335-5p靶向调控GRK4的表达,GRK4过表达逆转了miR-335-5p过表达对ox-LDL诱导的HA-VSMC细胞损伤的作用.结论 ox-LDL能够诱导HA-VSMC细胞损伤,miR-335-5p通过抑制TNF-α、IL-1β分泌和GRK4的表达对HA-VSMC细胞发挥保护作用.
其他文献
目的 探讨黄葵胶囊对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响及其潜在机制.方法 取成对数期生长的人肾小管上皮细胞HK-2,将其随机分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)和实验组(25 mmol/L葡萄糖+1 g/ml黄葵胶囊粉末混悬液).用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-8含量;用CCK-8法检测人肾小管上皮细胞存活率;用TUNEL法检测人肾小管上皮细胞凋亡率;用Western印迹法检测神经源性位点缺口同源蛋白(Notch)1、转录因子H
目的 探讨丹参酮ⅡA磺酸钠对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的治疗作用及其机制.方法 采用烟熏加气管滴注脂多糖复合造模的方法建立老年COPD大鼠模型.丹参酮ⅡA磺酸钠大、中、小剂量组分别腹腔注射给予10.0、5.0和2.5 mg/kg,正常对照组和模型对照组大鼠分别腹腔注射给予同体积的生理盐水,各组大鼠的治疗周期均为2 w.实验结束时末次给药后1 h测定各组大鼠肺功能、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数、血清炎症细胞因子水平、肺组织磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路基因和
目的 研究微小RNA(miR)-137通过靶向无翅和整合位点生长因子5a(Wnt5a)抑制宫颈癌细胞生长及其作用机制.方法 采用qPCR检测宫颈癌细胞HeLa、C33A、Caski中miR-137和Wnt5a mRNA的表达水平.Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-137靶向调控Wnt5a基因.常规培养宫颈癌细胞HeLa,分为NC组、miR-137 mimic组和miR-137 mimic+oe-Wnt5a组,采用脂质体2000进行各组细胞的转染.采用CCK-8实验、平板
目的 观察抑制CTNNA3表达对小鼠哮喘模型肺部气道炎症的影响.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹检测αT-钙黏着蛋白关联蛋白(αT-cat)的表达;利用卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立CTNNA3敲低小鼠哮喘模型,将其分为control组、AAV-shCTNNA3组、control+OVA组、AAV-shCTNNA3+OVA组、AAV-CTNNA3组及AAV-CT-NNA3+OVA组;强迫振荡法检测肺部容量和气道阻力;支气管肺泡灌洗(BAL)检测肺支气管炎症细胞和炎症因子;苏
目的 探讨苯甲酸钠(NaB)预处理对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用及相关机制.方法 SD大鼠随机分为3组:假手术(Sham)组,I/R组和I/R+NaB组,I/R+NaB组利用NaB预处理,术后24 h检测各组大鼠心肌梗死面积;心电图测定ST段波幅;自动生化分析仪检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTn)I及cTnT水平;流式细胞仪、DAPI、Tunel染色检测心肌细胞凋亡水平;Western印迹检测凋亡蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase
目的 探讨藁本内酯(LIG)调控死亡相关蛋白激酶(DAPK)1表达对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的保护作用.方法 将肺泡上皮细胞(A549)分为对照组,感染组,感染+LIG-低组、感染+LIG-中组、感染+LIG-高组、感染+si-NC组、感染+si-DAPK1组、感染+LIG+pcDNA组、感染+LIG+pcDNA-DAPK1组.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-10和IL-6水平;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测DAPK1 mRNA的表达水平;Wester
目的 探讨白花蛇舌草多糖(HDP)对皮肤鳞癌细胞A431增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪法分别检测不同浓度HDP对A431细胞增殖和凋亡的影响,Transwell法检测HDP对A431细胞迁移和侵袭的影响,qRT-PCR检测HDP对A431细胞中miR-21-5p表达的影响,构建抑制表达miR-21-5p的A431细胞并分析抑制miR-21-5p表达后细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化,构建过表达miR-21-5p和抑制表达PAG1的A431细胞并分析HDP对细胞
目的 研究和厚朴酚对高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞(MGMC)凋亡的影响及分子作用机制.方法 qRT-PCR检测miR-155、Smad3 mRNA的表达,Western印迹检测Smad3蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡率,双萤光素酶报告系统验证miR-155与Smad3的调控关系.结果 和厚朴酚可以抑制高糖诱导的MGMC凋亡,40μmol/L和厚朴酚抑制细胞凋亡效果最佳;和厚朴酚可以逆转高糖导致的MGMC中miR-155下调及Smad3上调;过表达miR-155和沉默Smad3均可减轻高糖对MGMC的促凋
目的 探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本(LncRNA ZFAS)1通过靶基因微小RNA-432-5p(miR-432-5p)调控肺癌细胞增殖和侵袭迁移的分子机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测不同肺癌细胞中Ln-cRNA ZFAS1、miR-432-5p的表达情况.双荧光素酶报告基因检测ZFAS1与miR-432-5p的相互作用.MTT实验检测抑制ZFAS1及miR-432-5p过表达后肺癌A549细胞增殖能力变化及抑制miR-432-5p的表达后肺癌A549细胞增殖能力的
目的 探讨复方利多卡因肋间神经阻滞联合全身镇痛对肋骨骨折模型大鼠心肺功能的保护作用及其作用机制.方法 将80只SD大鼠随机分为4组:对照组、模型组、全身镇痛组、联合镇痛组.除对照组以外,采用小型生物撞击装置制备肋骨骨折模型.模型制备成功后,全身镇痛组异丙酚联合瑞芬太尼全凭静脉麻醉下手术清创并复位,联合镇痛组在全身镇痛组基础上加用利多卡因肋间神经阻滞.实时监测基本生理参数,术后测定心肺功能、动脉血气、心脏系数、肺脏系数、肺泡通透性指数(LPI)与肺泡灌洗液炎性因子水平.结果 重复测量方差分析结果显示时间与组