【摘 要】
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目的 探讨外泌体中microRNA-335-5p（miR-335-5p）被胶质瘤细胞摄取并作用于肝激酶B1 （liver kinase B1,LKB1）影响胶质瘤细胞侵袭的分子机制。方法 通过外泌体提取试剂盒提取外泌体;运用透射电镜、粒度仪、Western blot法鉴定分离获取的外泌体;RT-PCR检测不同肿瘤细胞来源外泌体中miR-3 35-5p的表达量;外泌体摄取实验检测胶质瘤细胞对外泌体的
【机 构】
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潍坊医学院临床病理系/潍坊医学院附属医院病理科
【基金项目】
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国家自然科学基金（81872163）；
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目的 探讨外泌体中microRNA-335-5p（miR-335-5p）被胶质瘤细胞摄取并作用于肝激酶B1 （liver kinase B1,LKB1）影响胶质瘤细胞侵袭的分子机制。方法 通过外泌体提取试剂盒提取外泌体;运用透射电镜、粒度仪、Western blot法鉴定分离获取的外泌体;RT-PCR检测不同肿瘤细胞来源外泌体中miR-3 35-5p的表达量;外泌体摄取实验检测胶质瘤细胞对外泌体的摄取情况;Transwell实验检测加入外泌体后胶质瘤细胞的侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-335-5p是否靶向结合LKB1;Transwell实验检测转染miR-335-5p mimic后胶质瘤细胞的侵袭能力;Western blot法检测转染miR-335-5p mimic后胶质瘤细胞中LKB1和上皮-间质转化相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin和vimentin）的表达水平。结果 LN229细胞来源的外泌体中miR-335-5p表达水平明显高于H4细胞来源的外泌体;过表达miR-335-5p后LN229细胞侵袭能力增强;miR-3 35-5p靶向结合LKB1 mRNA的3’UTR区;miR-335-5p通过负向调控LKB1诱导胶质瘤细胞发生上皮-间质转化。结论 外泌体中的miR-335-5p被胶质瘤细胞摄取并通过抑制LKB1蛋白表达诱导细胞发生上皮-间质转化,从而促进胶质瘤细胞的侵袭。
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