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目的
观察miR-335-5p在高糖状态下对成骨细胞增殖、凋亡的影响并探讨其分子机制。
方法将MC3T3-E1成骨细胞分为正常对照组、高糖组、agomir-335-5p组及agomir阴性对照组(agomir NC组)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测细胞miR-335-5p与DKK1 mRNA的表达,Western印迹检测DKK1及caspase-3的蛋白表达水平。
结果与正常对照组相比,高糖组MC3T3-E1成骨细胞miR-335-5p mRNA的表达与细胞增殖明显降低(P<0.05),DKK1、caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡显著增加(P<0.05)。与高糖组和agomir NC组相比,agomir-335-5p组miR-335-5p mRNA的表达与细胞增殖显著增加(P<0.05),DKK1、caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡显著减少(P<0.05)。
结论高糖通过下调miR-335-5p的表达,进而上调DKK1的表达,从而抑制MC3T3-E1成骨细胞的增殖,诱导细胞凋亡。