【摘 要】
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目的 研究miR-335-5p对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 体外分离培养OA软骨细胞及正常软骨细胞,qRT-PCR法检测细胞中miR-335-5p表达,蛋白印迹法检测
【机 构】
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新乡市中心医院风湿免疫科,河南新乡453000;新乡市中心医院门诊手术部
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目的 研究miR-335-5p对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 体外分离培养OA软骨细胞及正常软骨细胞,qRT-PCR法检测细胞中miR-335-5p表达,蛋白印迹法检测Tnfrsf1a蛋白表达.将OA软骨细胞分为anti-miR-NC组、anti-miR-335-5p组、anti-miR-335-5p+ si-NC组和anti-miR-335-5p+ si-Tn-frsf1a组,MTT法、流式细胞术及蛋白印迹法分别检测细胞增殖、凋亡及p53和Survivin蛋白表达.双荧光素酶报告基因检测实验miR-335-5p与Tnfrsf1a靶向关系.2组间比较行成组t检验;多组间比较行单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 与正常软骨细胞比较,OA软骨细胞中miR-335-5p表达降低(0.31 ±0.08vs.1.00 ±0.00,t=25.875,P＜0.05),Tnfrsf1a蛋白表达升高(0.95 ±0.18 vs.0.18 ±0.03,=12.659,P＜0.05).与anti-miR-NC组比较,anti-miR-335-5p组OA软骨细胞OD值降低(0.27±0.01 vs.0.34±0.01,t=14.849,P＜0.05),凋亡率升高[(19.18±0.88)％vs.(6.89±0.33)％,t=39.230,P＜0.05],p53蛋白表达显著升高(P＜0.05),Survivin蛋白表达显著降低(P＜0.05).miR-335-5p靶向负调控Tnfrsf1a表达.与miR-335-5p+ si-NC组比较,miR-335-5p+ si-Tnfrsf1a组OA软骨细胞OD值升高,凋亡率降低,p53蛋白表达显著降低,Survivin蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 敲减miR-335-5p可靶向Tnfrsf1a抑制OA软骨细胞增殖并促进其凋亡,miR-335-5p有可能成为OA治疗的新靶点.
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