【摘 要】
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目的 检测miR-485-5p在Kaposi肉瘤中的表达水平,以及对SOX5表达调控的影响.方法 采用实时荧光定量PCR法检测miR-485-5p和SOX5在Kaposi肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)患者肿瘤及瘤
【机 构】
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新疆地方与民族高发病重点实验室,新疆石河子832000;石河子大学医学院第一附属医院口腔科,新疆石河子832000
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目的 检测miR-485-5p在Kaposi肉瘤中的表达水平,以及对SOX5表达调控的影响.方法 采用实时荧光定量PCR法检测miR-485-5p和SOX5在Kaposi肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)患者肿瘤及瘤旁组织中的表达水平.通过生物信息学分析发现转录因子SOX5为miR-485-5p的一个潜在靶基因.构建SOX5 3'UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因质粒,分别与miR-485-5p模拟物(miR-485-5pmimic)或miR-485-5p抑制剂(miR-485-5p inhibitor)及对照共同转染HEK293T细胞,通过双荧光素酶报告基因检测各组细胞的荧光素酶活性.分别转染miR-485-5p mimic、miR-485-5p inhibitor和miR-485-5p NC至Kaposi肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染细胞iSLK-BAC,采用实时荧光定量PCR和Western blot方法分别检测SOX5的mRNA和蛋白表达水平.结果 KS肿瘤组织中miR-485-5p高水平表达比例较瘤旁组织明显升高(P ＜0.001),并且miR-485-5p直接靶向调控转录因子SOX5.转染miR-485-5p mimic或miR-485-5p inhibitor可降低或升高SOX5的表达水平.结论 miR-485-5p在Kaposi肉瘤中高表达,并且负向调控SOX5的表达.
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