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利用RNA干扰技术构建PYG01基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒(pSUPER-PYG01)。首先,针对PYG01cDNA序列设计并化学合成一对编码短发夹RNA序列,经退火插入到由Bgl11和XhoI酶切的pSU-PER质粒上构建重组RNAi质粒pSUPER-PYG01。通过XbaI酶切鉴定及测序分析验证构建效果,将正确构建的质粒转染大鼠心肌细胞系H9c2建立产生逆转录病毒的细胞克隆。通过RT-PCR和Westernblot检测pSU-PER-PYG01对H9c2细胞中PYG01 mRNA和PYG