【摘 要】
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目的通过氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）体外模拟细胞缺血缺氧,观察人牙髓细胞（human dental pulp cells,hDPCs）内质网应激变化,为缺血缺氧条件调控hDPCs的机制研究提供依据。方法应用无糖DMEM培养液联合低氧培养（体积分数2%O2）构建hDPCs OGD模型,体外模拟hDPCs缺血缺氧,设置对照组和实验组。对照组:常规培养;实验组
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔综合科,上海交通大学口腔医学院,国家口腔医学中心,国家口腔疾病临床研究中心,上海市口腔医学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81700949）~~；
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目的通过氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）体外模拟细胞缺血缺氧,观察人牙髓细胞（human dental pulp cells,hDPCs）内质网应激变化,为缺血缺氧条件调控hDPCs的机制研究提供依据。方法应用无糖DMEM培养液联合低氧培养（体积分数2%O2）构建hDPCs OGD模型,体外模拟hDPCs缺血缺氧,设置对照组和实验组。对照组:常规培养;实验组:OGD处理0、2、4、8 h。MTT检测hDPCs OGD处理0、2、4、8 h后细胞存活率;qRT-PCR检测h DPCs内质网应激关键分子:剪切X盒结合蛋白1（splicing x-box binding protein 1,sXBP1）、活化转录因子4（activating transcription factor 4,ATF4）、C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,chop）mRNA水平,Western blot检测内质网应激关键蛋白:磷酸化蛋白激酶样内质网激酶（phosphorylated RNA-activated protein kinase-like ER-resident kinase,p-perk）、磷酸化真核起始因子-2α（phosphorylated eukaryotic initiation factor-2α,p-eIF2α）表达水平。结果相较于OGD处理0 h,OGD培养hDPCs 2、4、8 h后,死亡细胞增多,细胞存活率显著下降（P<0.05）。与对照组相比,OGD处理4 h后,hDPCs内质网应激关键信号分子sXBP1、ATF4、CHOP mRNA表达水平升高;内质网应激关键蛋白p-perk、p-eIF2α表达增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 hDPCs OGD培养条件下内质网应激水平明显升高。
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