【摘 要】
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目的 构建干扰FLOT2表达的慢病毒载体,探讨抑制FLOT2表达对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制.方法 通过qRT-PCR检测结直肠癌组织及人结肠癌LoVo、SW480及HT29细胞FLOT2的表达水平,Western blot检测结肠癌细胞FLOT2表达.将含FLOT2 siRNA的慢病毒载体转染结肠癌LoVo细胞和SW480细胞.采用qRT-PCR及Western blot检测转染后的细胞FLOT2表达.MTT法、流式细胞术、Transwell小室、West-ern blot分别检测细胞
【机 构】
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宜宾市第二人民医院急诊科,四川 宜宾 644000;宜宾市第二人民医院检验科,四川 宜宾 644000;宜宾市第二人民医院胃肠外科,四川 宜宾 644000
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目的 构建干扰FLOT2表达的慢病毒载体,探讨抑制FLOT2表达对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制.方法 通过qRT-PCR检测结直肠癌组织及人结肠癌LoVo、SW480及HT29细胞FLOT2的表达水平,Western blot检测结肠癌细胞FLOT2表达.将含FLOT2 siRNA的慢病毒载体转染结肠癌LoVo细胞和SW480细胞.采用qRT-PCR及Western blot检测转染后的细胞FLOT2表达.MTT法、流式细胞术、Transwell小室、West-ern blot分别检测细胞增殖能力、凋亡率、侵袭迁移能力及PCNA、cleaved caspase3、E-cadherin和Vimentin蛋白水平.结果 结直肠癌组织FLOT2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织,三个结肠癌细胞FLOT2 mRNA及蛋白水平均明显高于在正常结肠上皮细胞NCM460(P<0.05).LoVo细胞和SW480细胞转染FLOT2 siRNA慢病毒载体后,FLOT2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低,且可明显降低细胞增殖、侵袭和迁移能力,促进细胞凋亡,下调PCNA和Vimentin表达,上调cleaved caspase3和E-cadherin(P<0.05).结论 抑制FLOT2表达可明显降低结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,促进细胞凋亡,其机制可能与调节PCNA、cleaved caspase3、E-cadherin和Vimentin表达有关.
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