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摘要：目的：优选出痔宁胶囊的最佳提取工艺。方法：采用正交设计的试验方法，以干浸膏得率、黄芩苷含量为考核指标，优选出最佳的醇提和水提工艺。结果：醇提的最佳工艺为：70%乙醇，加6倍量，回流2次，第一次2小时，第二次1小时；水提的最佳工艺为：加8倍水，煎煮2次，每次2小时。结论：该提取工艺稳定可行。
关键词：痔宁胶囊；黄芩苷；提取工艺；正交试验
【中图分类号】R943【文献标识码】B【文章编号】1672-8602（2014）06-0247-02
痔宁胶囊是由槐角（炒）、地榆（炭）、黄芩等八味药组成的方剂。组方中的有效成分主要为甙类、黄酮等[1]。试验选用乙醇回流提取；再用传统的水煎煮提取。以黄芩苷的含量和干膏量为指标，采用正交实验优选最佳试验参数。
1.仪器和材料
HP一1100高效液相色谱仪（Agilent）、Agilent色谱工作站、CQ一250超声波处理器（中国上海船舶电子设备研究所）、CS-501超级恒温器（重庆实验设备厂）、氧气瓶（航天医学工程研究所）；黄芩苷（中国药品生物制品检定所），所用试剂中除流动相为色谱纯级，其余均为分析纯级，水为重蒸水；所用药材购自湖北省药材公司，经检验均符合2005年版中国药典一部规定。
2方法与结果
2.1醇提工艺条件的选择：
2.1.1醇提次数的选择
根据预试验情况，从乙醇浓度、加醇量、提取次数、提取时间几方面进行考查。首先采用单因素试验法确定提取的次数，方法如下：
取处方量的药材，加6倍量60%乙醇，分别回流提取1、2、3次，每次2小时，过滤，滤液减压浓缩并干燥至恒重，称取干膏重量，采用高效液相色谱法测黄芩苷含量[2]，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
由以上实验可以看出，当提取3次时，出膏率最大，但与提取2次的差别不大，且黄芩甘的含量与提取2次的结果相当，为了节省能源，缩短工时，选择提取2次较好。
2.1.2醇提工艺正交试验
在此基础上，采用正交试验的方法继续对回流的乙醇浓度、加醇量、提取时间三个因素进行优选，并在预试验的基础上确定以下因素水平表：
试验方法是：分别取1倍处方量的药材，按正交试验设计表中设定的方案进行提取，滤过，滤液减压浓缩并干燥至恒重，称取干膏重量，并按上法测黄芩苷含量，试验结果3：
以黄芩苷含量为考核指标，应选A3B2C3；以干膏量为考核指标，应选A1B3C3。但仔细观察C2、C3，无论以黄芩苷含量还是以干膏量为考核指标，差距都不大，但从提高效率的角度讲，选择C2较好；以干膏量为考核指标，B2与B3的差异也不大，但选择B2可以提高黄芩苷的含量，因此选择B2较好；由于黄芩苷的含量是关键考核指标，干膏量的多少对提取效果的判断没有明确的意义，因此在确定因素A时着重考虑黄芩苷含量，选择A3较好。
最终将乙醇回流的工艺条件定为A3B2C2，即以6倍量的70%乙醇回流2次，第一次2小时，第二次1小时。
2.1.3醇提工艺验证
取处方量的药材，按优选的最佳工艺进行提取、浓缩、干燥，计算浸膏得率及检测黄芩苷的含量，结果4：
2.2水提工艺条件的选择：
2.2.1水提工艺正交试验
根据生产实践经验，影响提取效果的因素有以下三个方面：加水量、提取次数、提取时间，故我们在预实验的基础上，设立了以下4个因素3个水平，按照L9（34）正交表安排试验，5：
分别取1倍处方量的药材，首先按醇提部分优选的最佳方案进行提取后，药渣按设定的方案进行提取，滤过，滤液合并，浓缩成稠膏，干燥，称重。由于黄芩苷在水提浸膏中的含量也比较高，因此仍以黄芩苷含量作为水提部分的主要考核指标。测黄芩苷含量，试验结果6：
以黄芩苷含量为考核指标，应选A2B2C2；以干膏量为考核指标，应选择A3B3C3，但仔细分析，A2与A3、B2与B3、C2与C3对干膏量的影响不大，从缩短工时，节省能源考虑，同时为提高黄芩苷的含量，选择A2、B2、C2较好。最终我们确定的工艺为A2B2C2，即加8倍水，煎煮2次，每次2小时。
2.2.2水提工艺验证
取处方量的药材，按照优选的最佳工艺条件，进行三次重复试验，计算干膏量及检测黄芩苷含量，结果7：
从以上的验证试验结果来看，表明三次试验的结果无明显差异，说明该工艺稳定、可行。
3讨论
方中的当归、防风、陈皮含有挥发油，挥发油中主要含有烯萜类及其它链状脂肪族化合物等酯溶性成分，这些成分多数有活血止痛、润肠通便、抗炎抑菌的功能[3]。试验采用较高浓度的乙醇提取方中的甙类、黄酮等成分，同时也能最大限度地提取挥发油中的酯溶性成分。药效学试验表明，制剂具有很好的抗炎、镇痛、止血、抑菌等作用，表明该方法对有效成分的提取比较充分，效果较好。
参考文献
[1]王丽华，段玉峰，丁红军，等.槐角丸的研究进展[J].现代生物医学进展，2007，7（5）：793-794
[2]中国药典[S].二部.2005：642-643；211-212.
[3]王本祥.现代中药药理与临床[M].天津.天津科技翻译出版公司，2004：582-583.
关键词：痔宁胶囊；黄芩苷；提取工艺；正交试验
【中图分类号】R943【文献标识码】B【文章编号】1672-8602（2014）06-0247-02
痔宁胶囊是由槐角（炒）、地榆（炭）、黄芩等八味药组成的方剂。组方中的有效成分主要为甙类、黄酮等[1]。试验选用乙醇回流提取；再用传统的水煎煮提取。以黄芩苷的含量和干膏量为指标，采用正交实验优选最佳试验参数。
1.仪器和材料
HP一1100高效液相色谱仪（Agilent）、Agilent色谱工作站、CQ一250超声波处理器（中国上海船舶电子设备研究所）、CS-501超级恒温器（重庆实验设备厂）、氧气瓶（航天医学工程研究所）；黄芩苷（中国药品生物制品检定所），所用试剂中除流动相为色谱纯级，其余均为分析纯级，水为重蒸水；所用药材购自湖北省药材公司，经检验均符合2005年版中国药典一部规定。
2方法与结果
2.1醇提工艺条件的选择：
2.1.1醇提次数的选择
根据预试验情况，从乙醇浓度、加醇量、提取次数、提取时间几方面进行考查。首先采用单因素试验法确定提取的次数，方法如下：
取处方量的药材，加6倍量60%乙醇，分别回流提取1、2、3次，每次2小时，过滤，滤液减压浓缩并干燥至恒重，称取干膏重量，采用高效液相色谱法测黄芩苷含量[2]，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
由以上实验可以看出，当提取3次时，出膏率最大，但与提取2次的差别不大，且黄芩甘的含量与提取2次的结果相当，为了节省能源，缩短工时，选择提取2次较好。
2.1.2醇提工艺正交试验
在此基础上，采用正交试验的方法继续对回流的乙醇浓度、加醇量、提取时间三个因素进行优选，并在预试验的基础上确定以下因素水平表：
试验方法是：分别取1倍处方量的药材，按正交试验设计表中设定的方案进行提取，滤过，滤液减压浓缩并干燥至恒重，称取干膏重量，并按上法测黄芩苷含量，试验结果3：
以黄芩苷含量为考核指标，应选A3B2C3；以干膏量为考核指标，应选A1B3C3。但仔细观察C2、C3，无论以黄芩苷含量还是以干膏量为考核指标，差距都不大，但从提高效率的角度讲，选择C2较好；以干膏量为考核指标，B2与B3的差异也不大，但选择B2可以提高黄芩苷的含量，因此选择B2较好；由于黄芩苷的含量是关键考核指标，干膏量的多少对提取效果的判断没有明确的意义，因此在确定因素A时着重考虑黄芩苷含量，选择A3较好。
最终将乙醇回流的工艺条件定为A3B2C2，即以6倍量的70%乙醇回流2次，第一次2小时，第二次1小时。
2.1.3醇提工艺验证
取处方量的药材，按优选的最佳工艺进行提取、浓缩、干燥，计算浸膏得率及检测黄芩苷的含量，结果4：
2.2水提工艺条件的选择：
2.2.1水提工艺正交试验
根据生产实践经验，影响提取效果的因素有以下三个方面：加水量、提取次数、提取时间，故我们在预实验的基础上，设立了以下4个因素3个水平，按照L9（34）正交表安排试验，5：
分别取1倍处方量的药材，首先按醇提部分优选的最佳方案进行提取后，药渣按设定的方案进行提取，滤过，滤液合并，浓缩成稠膏，干燥，称重。由于黄芩苷在水提浸膏中的含量也比较高，因此仍以黄芩苷含量作为水提部分的主要考核指标。测黄芩苷含量，试验结果6：
以黄芩苷含量为考核指标，应选A2B2C2；以干膏量为考核指标，应选择A3B3C3，但仔细分析，A2与A3、B2与B3、C2与C3对干膏量的影响不大，从缩短工时，节省能源考虑，同时为提高黄芩苷的含量，选择A2、B2、C2较好。最终我们确定的工艺为A2B2C2，即加8倍水，煎煮2次，每次2小时。
2.2.2水提工艺验证
取处方量的药材，按照优选的最佳工艺条件，进行三次重复试验，计算干膏量及检测黄芩苷含量，结果7：
从以上的验证试验结果来看，表明三次试验的结果无明显差异，说明该工艺稳定、可行。
3讨论
方中的当归、防风、陈皮含有挥发油，挥发油中主要含有烯萜类及其它链状脂肪族化合物等酯溶性成分，这些成分多数有活血止痛、润肠通便、抗炎抑菌的功能[3]。试验采用较高浓度的乙醇提取方中的甙类、黄酮等成分，同时也能最大限度地提取挥发油中的酯溶性成分。药效学试验表明，制剂具有很好的抗炎、镇痛、止血、抑菌等作用，表明该方法对有效成分的提取比较充分，效果较好。
参考文献
[1]王丽华，段玉峰，丁红军，等.槐角丸的研究进展[J].现代生物医学进展，2007，7（5）：793-794
[2]中国药典[S].二部.2005：642-643；211-212.
[3]王本祥.现代中药药理与临床[M].天津.天津科技翻译出版公司，2004：582-583.