【摘 要】
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目的 探讨培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法 实验分为3组：高糖DMEM培养基组（DMEM组）;高糖DMEM/α-MEM培养基组（DMEM/α-MEM组）;α-MEM培养基组（α-MEM组）。按常规方法采用上述3种培养基进行破骨细胞培养，培养5 d后，采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase, TRAP）染色观察
【机 构】
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中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（82074299）；
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目的 探讨培养基对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法 实验分为3组：高糖DMEM培养基组（DMEM组）;高糖DMEM/α-MEM培养基组（DMEM/α-MEM组）;α-MEM培养基组（α-MEM组）。按常规方法采用上述3种培养基进行破骨细胞培养，培养5 d后，采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase, TRAP）染色观察各组破骨细胞的形成情况，并采用实时荧光定量PCR方法观察破骨细胞分化相关标志物NFATc-1、c-Fos和TRAF-6 mRNA的表达；培养11 d后采用甲苯胺蓝染色进行骨陷窝面积分析，观察破骨细胞骨吸收功能情况。结果 3组均可以观察到典型的TRAP+破骨细胞。与DMEM组相比，DMEM/α-MEM组、α-MEM组TRAP+破骨细胞数量明显增加（P＜0.01）,但各组形态略有不同。在骨吸收功能上，与DMEM组和DMEM/α-MEM组相比，α-MEM组骨陷窝面积明显增加（P＜0.01）。在破骨细胞分化相关调控因子表达上，与DMEM组相比，α-MEM组NFATc-1、c-Fos和TRAF-6 mRNA表达显著增加（P＜0.01,P＜0.05）;DMEM/α-MEM组NFATc-1 mRNA表达显著增加（P＜0.01）,c-Fos和TRAF-6 mRNA表达有增加的趋势，但差异无统计学意义；α-MEM组与DMEM/α-MEM组比较差异无统计学意义。结论 高糖DMEM培养基、高糖DMEM/α-MEM培养基、α-MEM培养基均可用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导分化破骨细胞的实验；从破骨细胞数量、状态及功能来看，α-MEM培养基更适合做为破骨细胞分化培养基。
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