【摘 要】
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目的高效包装不同启动子的重组慢病毒（LV）,建立LV的定量方法。方法采用分子克隆方法获得p FUGW、p TY-EF1α-EGFP及p TY-CMV-EGFP 3种转移质粒,然后采用脂质体法与另两种包装质
【机 构】
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南方医科大学生物技术学院输血医学系,南方医科大学公共卫生与热带医学学院三级生物安全实验室,山东省潍坊市临朐县中医院骨外科,广州军区疾病预防控制中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：81301433）
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目的高效包装不同启动子的重组慢病毒（LV）,建立LV的定量方法。方法采用分子克隆方法获得p FUGW、p TY-EF1α-EGFP及p TY-CMV-EGFP 3种转移质粒,然后采用脂质体法与另两种包装质粒p SPAX2及p MD2.G共同转染293T细胞,制备含有不同启动子的LV。设计针对3’-LTR的探针和引物,建立LV的荧光定量PCR定量方法。结果获得了不同启动子的转移质粒,制备了3种不同启动子的LV,应用荧光定量PCR方法测定制备的病毒,载量能达到109copies/ml。结论成功构建了不同启动子
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