【摘 要】
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通过对比猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus,TGEV）主要流行毒株的M基因序列,选择其高度保守的区域设计LAMP引物,以羟基萘酚蓝（HNB）为指示剂,建立了1种快速检测TGEV的可视化环介导等温扩增方法。结果显示,采用建立的方法在恒温水浴锅中约1 h即可完成检测;用该方法检测猪流行性腹泻病毒,猪轮状病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪细小病毒,猪
【基金项目】
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国家重点研发计划项基金资助目（2016YFD0500706）； 陕西省农业科技创新转化基金资助项目（NYKJ-2018-06）；
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通过对比猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus,TGEV）主要流行毒株的M基因序列,选择其高度保守的区域设计LAMP引物,以羟基萘酚蓝（HNB）为指示剂,建立了1种快速检测TGEV的可视化环介导等温扩增方法。结果显示,采用建立的方法在恒温水浴锅中约1 h即可完成检测;用该方法检测猪流行性腹泻病毒,猪轮状病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪细小病毒,猪圆环病毒,均不发生交叉反应;以pET-21b-M质粒为模板评价所建立方法的敏感性,最低检测限为3.7×10~3个拷贝,比普通PCR方法高2个数量级;在反应前向反应体系中加入HNB,反应结束后阳性反应管颜色从紫罗兰色变为天蓝色,阴性反应管颜色无变化,且阴阳性管颜色差异明显。用建立的方法对收集的42份临床腹泻样品进行检测,共检测到21份样品阳性。为快速检测TGEV提供方法。
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