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摘要：目的：分析迁延性肺炎患儿的临床特点以及病原体等，为临床的治疗提供必要的依据。方法：对2014年2月至2015年1月我院收治的迁延性肺炎58例患儿的临床资料进行回顾性分析，观察其临床症状，通过收集患儿的鼻咽抽吸物标本和血标本，用直接免疫荧光法、K-B纸片扩散法和药敏分析系统进行检测，分析其病原学。结果：58例患儿在细菌检查中共检出42例，细菌检出率为72%，其中包括革兰氏阳性菌13例，革兰氏阴性菌29例，经过直接免疫荧光实验检查呼吸道病毒，有32例为阳性，检出率为55%，58例患儿的衣原体检出12例，检出率为21%，支原体检出8例，检出率为14%。其中有30例患儿的痰液行真菌培养后，结果显示为阳性的有4例，检出率为13.33%。结论：延性肺炎患者主要的感染菌为细菌，除此之外病毒、衣原体和支原体等不典型的病原体也会感染延性肺炎患儿，因此，要予以延性肺炎患者一定的预防措施防止患者发生感染并在最大程度上降低感染率。
关键词：迁延性肺炎；患病儿童；病原学
肺炎是临床上一种常见的多发的疾病，迁延性肺炎是指肺炎的病程不超过3个月的肺炎疾病[1]。迁延性肺炎具有病程长、易反复等特点，对患者的生活质量有严重的影响[2]。本次研究共选取58例迁延性患儿进行试验，通过观察其临床症状以及相关的试验检查分析其病原体情况，现做如下报道。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2014年2月至2015年1月我院收治的迁延性肺炎58例患儿作为研究对象，其中男性患儿26例，女性患儿32例，年龄在2-5岁之间，平均年龄在3.2±0.6岁之间，农村患儿42例，城市患儿16例，所有患儿均符合迁延性肺炎的诊断标准[3]。
1.2材料
1.2.试验仪器
离心机；冰箱、荧光显微镜；高压蒸汽灭菌锅
1.2.2试验试剂
磷酸盐缓冲液；病毒转移液；病毒保存液；丙酮
1.3临床特征
患儿的临床症状表现为不同程度的发热、呼吸困难、喘息、咳嗽、发绀等症状。
1.4研究方法
1.4.1标本的采集和培养
所有患儿入院后先进行口腔清洁，用痰液收集器抽取深部气管的分泌物进行检查，将分泌物置于含有病毒转移液的无菌离心管中，送入实验室进行检查，将采集的标本分为2份，1份用离心机1500r/min离心5-10min后将细胞沉渣悬于磷酸盐缓冲液，主要用于直接免疫荧光法检查病毒类型，另1份用于痰培养，同时对每位患儿采取静脉血1-2ml行支原体和衣原体的检测。
1.4.2直接免疫荧光检测呼吸道病毒
根据试剂盒的说明书进行操作，具体如下：①细胞用磷酸盐缓冲液洗3-5次直到黏液完全清除，在1500r/min的离心机上离心5-10min。②用磷酸盐缓冲液将悬细胞沉渣形成云雾状悬液。③用移液管吸取1滴悬液至干净的载玻片上，风干。④将载玻片用丙酮固定，防止发生污染。⑤在对照玻片的每个孔和加样玻片的每个孔滴加1滴DFA试剂，孵育30min。⑥磷酸盐缓冲液冲洗玻片，再将其置于振荡器上震荡5min，重复2遍，保证洗涤彻底。再用蒸馏水洗涤1min，风干。⑦盖上盖玻片，吸取盖玻片边缘的封闭液。⑧在荧光显微镜下观察结果。⑨绿色荧光：病毒抗原阳性细胞；红色：没有发生抗原抗体特异性反应的细胞。⑩阳性判断：在200倍的显微镜视野中找到超过2个阳性细胞则为阳性标本。
1.4.3痰液培养
用痰液收集器抽取患儿深部气管的分泌物进行检查，将痰液标本接种于血平板上放在含有CO2的的恒温箱内培养48h，对于有细菌生长的予以革兰氏染色并涂片，用K-B纸片扩散法和药敏分析系统进行细菌的分离和鉴定。
1.4.4支原体和衣原体的检测方法
采取患儿静脉血后用ELISA法进行检测，检测判断标准为[4]：①肺炎支原体感染：肺炎支原体抗体超过1：160；②肺炎衣原体感染：肺炎衣原体IgM为阳性。
1.5统计学处理
本试验数据均采用SPSS17.0软件进行统计分析，计数资料以百分率（%）表示，采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1细菌检查结果
58例患儿在细菌检查中共检出42例，细菌检出率为72%，其中包括革兰氏阳性菌13例，其中最多的为肺炎链球菌7例，占的比例为54%，其次为金黄色葡萄球菌4例，占的比例为31%，其他为2例，占的比例为15%；革兰氏阴性菌29例，其中包括肺炎克雷伯杆菌14例，占的比例为48%，副流感嗜血杆菌6例，占的比例为21%，铜绿假单胞菌5例，占的比例为17%，肠埃希菌2例，占的比例为7%，其他2例，占的比例为7%。
2.2呼吸道病毒检查结果
经过直接免疫荧光实验检查呼吸道病毒主要包括流感病毒A型和流感病毒B型、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、呼吸道合胞病毒以及腺病毒等，阳性标本显示超过2个为绿色荧光细胞，阴性标本为红色，结果显示，58例患儿中有32例为阳性，检出率为55%，其中包括流感病毒A型5例，占检出率的16%，副流感病毒3型8例，占检出率的25%，呼吸道合胞病毒18例，占检出率的56%，腺病毒1例，占检出率的3%。
2.3支原体和衣原体的检查结果
58例患儿中衣原体检出12例，检出率为21%，支原体检出8例，检出率为14%。58例患儿中有30例患儿的痰液行真菌培养后，结果显示，阳性的有4例，检查率为13.33%。
3讨论
由于国内对延性性肺炎的病原学的研究相对较少，因此，迁延性肺炎成为临床上较为棘手的问题。相关研究报道显示，感染是导致迁延性肺炎病发生的重要原因[5]。本次研究中结果显示，细菌的检出率占72%证实了感染对迁延性肺炎病发生有重要的影响。国外的相关研究者还发现除了细菌外，一些不典型的病原体衣原体、支原体等对延性性肺炎也有一定的影响，因此掌握患者的基础病，完善病原体的检查并予以针对性治疗对于改善患者的临床治疗效果具有重要意义[6]。
本次研究结果表明，58例患儿在细菌检查中共检出42例，细菌检出率为72%，其中包括革兰氏阳性菌13例，革兰氏阴性菌29例，经过直接免疫荧光实验检查呼吸道病毒，有32例为阳性，检出率为55%，58例患儿的衣原体检出12例，检出率为21%，支原体检出8例，检出率为14%。其中有30例患儿的痰液行真菌培养后，结果为阳性的有4例，检查率为13.33%。结合上述观点，我们认为延性肺炎患者主要的感染菌为细菌，其次病毒、衣原体和支原体也会感染延性肺炎患儿，因此，要予以延性肺炎患者一定的预防措施防止降低感染率。
参考文献：
[1]石远滨.重庆地区儿童迁延性肺炎的临床特征和病原学分析[D].重庆医科大学，2010.
[2]石远滨，符州，罗征秀.儿童迁延性肺炎的临床特点及病原学分析[J].临床儿科杂志，2010，28（05）：462-464.
[3]Edmod MB，Wallace SE，McClish DK，etal.Nosocomial bloodstream infectious in United States hospitals：a three-year analysis[J].Clin infect Dis，2010，29（02）：239-244.
[4]黄建宝，孟燕妮，陈璐，陈艳萍.儿童迁延性肺炎111例临床分析[J].临床儿科杂志，2012，16（12）：1150-1152.
[5]潘贤春.综合疗法治疗儿童迁延性肺炎疗效观察[J].临床合理用药杂志，2014，17（16）：33-34.
[6]Bartlett NW， McLean GR， Chang YS， Johnston SL. Genetics and epidemiology：asthma and infection. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2011，9（5）：395-400.
关键词：迁延性肺炎；患病儿童；病原学
肺炎是临床上一种常见的多发的疾病，迁延性肺炎是指肺炎的病程不超过3个月的肺炎疾病[1]。迁延性肺炎具有病程长、易反复等特点，对患者的生活质量有严重的影响[2]。本次研究共选取58例迁延性患儿进行试验，通过观察其临床症状以及相关的试验检查分析其病原体情况，现做如下报道。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2014年2月至2015年1月我院收治的迁延性肺炎58例患儿作为研究对象，其中男性患儿26例，女性患儿32例，年龄在2-5岁之间，平均年龄在3.2±0.6岁之间，农村患儿42例，城市患儿16例，所有患儿均符合迁延性肺炎的诊断标准[3]。
1.2材料
1.2.试验仪器
离心机；冰箱、荧光显微镜；高压蒸汽灭菌锅
1.2.2试验试剂
磷酸盐缓冲液；病毒转移液；病毒保存液；丙酮
1.3临床特征
患儿的临床症状表现为不同程度的发热、呼吸困难、喘息、咳嗽、发绀等症状。
1.4研究方法
1.4.1标本的采集和培养
所有患儿入院后先进行口腔清洁，用痰液收集器抽取深部气管的分泌物进行检查，将分泌物置于含有病毒转移液的无菌离心管中，送入实验室进行检查，将采集的标本分为2份，1份用离心机1500r/min离心5-10min后将细胞沉渣悬于磷酸盐缓冲液，主要用于直接免疫荧光法检查病毒类型，另1份用于痰培养，同时对每位患儿采取静脉血1-2ml行支原体和衣原体的检测。
1.4.2直接免疫荧光检测呼吸道病毒
根据试剂盒的说明书进行操作，具体如下：①细胞用磷酸盐缓冲液洗3-5次直到黏液完全清除，在1500r/min的离心机上离心5-10min。②用磷酸盐缓冲液将悬细胞沉渣形成云雾状悬液。③用移液管吸取1滴悬液至干净的载玻片上，风干。④将载玻片用丙酮固定，防止发生污染。⑤在对照玻片的每个孔和加样玻片的每个孔滴加1滴DFA试剂，孵育30min。⑥磷酸盐缓冲液冲洗玻片，再将其置于振荡器上震荡5min，重复2遍，保证洗涤彻底。再用蒸馏水洗涤1min，风干。⑦盖上盖玻片，吸取盖玻片边缘的封闭液。⑧在荧光显微镜下观察结果。⑨绿色荧光：病毒抗原阳性细胞；红色：没有发生抗原抗体特异性反应的细胞。⑩阳性判断：在200倍的显微镜视野中找到超过2个阳性细胞则为阳性标本。
1.4.3痰液培养
用痰液收集器抽取患儿深部气管的分泌物进行检查，将痰液标本接种于血平板上放在含有CO2的的恒温箱内培养48h，对于有细菌生长的予以革兰氏染色并涂片，用K-B纸片扩散法和药敏分析系统进行细菌的分离和鉴定。
1.4.4支原体和衣原体的检测方法
采取患儿静脉血后用ELISA法进行检测，检测判断标准为[4]：①肺炎支原体感染：肺炎支原体抗体超过1：160；②肺炎衣原体感染：肺炎衣原体IgM为阳性。
1.5统计学处理
本试验数据均采用SPSS17.0软件进行统计分析，计数资料以百分率（%）表示，采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1细菌检查结果
58例患儿在细菌检查中共检出42例，细菌检出率为72%，其中包括革兰氏阳性菌13例，其中最多的为肺炎链球菌7例，占的比例为54%，其次为金黄色葡萄球菌4例，占的比例为31%，其他为2例，占的比例为15%；革兰氏阴性菌29例，其中包括肺炎克雷伯杆菌14例，占的比例为48%，副流感嗜血杆菌6例，占的比例为21%，铜绿假单胞菌5例，占的比例为17%，肠埃希菌2例，占的比例为7%，其他2例，占的比例为7%。
2.2呼吸道病毒检查结果
经过直接免疫荧光实验检查呼吸道病毒主要包括流感病毒A型和流感病毒B型、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副流感病毒3型、呼吸道合胞病毒以及腺病毒等，阳性标本显示超过2个为绿色荧光细胞，阴性标本为红色，结果显示，58例患儿中有32例为阳性，检出率为55%，其中包括流感病毒A型5例，占检出率的16%，副流感病毒3型8例，占检出率的25%，呼吸道合胞病毒18例，占检出率的56%，腺病毒1例，占检出率的3%。
2.3支原体和衣原体的检查结果
58例患儿中衣原体检出12例，检出率为21%，支原体检出8例，检出率为14%。58例患儿中有30例患儿的痰液行真菌培养后，结果显示，阳性的有4例，检查率为13.33%。
3讨论
由于国内对延性性肺炎的病原学的研究相对较少，因此，迁延性肺炎成为临床上较为棘手的问题。相关研究报道显示，感染是导致迁延性肺炎病发生的重要原因[5]。本次研究中结果显示，细菌的检出率占72%证实了感染对迁延性肺炎病发生有重要的影响。国外的相关研究者还发现除了细菌外，一些不典型的病原体衣原体、支原体等对延性性肺炎也有一定的影响，因此掌握患者的基础病，完善病原体的检查并予以针对性治疗对于改善患者的临床治疗效果具有重要意义[6]。
本次研究结果表明，58例患儿在细菌检查中共检出42例，细菌检出率为72%，其中包括革兰氏阳性菌13例，革兰氏阴性菌29例，经过直接免疫荧光实验检查呼吸道病毒，有32例为阳性，检出率为55%，58例患儿的衣原体检出12例，检出率为21%，支原体检出8例，检出率为14%。其中有30例患儿的痰液行真菌培养后，结果为阳性的有4例，检查率为13.33%。结合上述观点，我们认为延性肺炎患者主要的感染菌为细菌，其次病毒、衣原体和支原体也会感染延性肺炎患儿，因此，要予以延性肺炎患者一定的预防措施防止降低感染率。
参考文献：
[1]石远滨.重庆地区儿童迁延性肺炎的临床特征和病原学分析[D].重庆医科大学，2010.
[2]石远滨，符州，罗征秀.儿童迁延性肺炎的临床特点及病原学分析[J].临床儿科杂志，2010，28（05）：462-464.
[3]Edmod MB，Wallace SE，McClish DK，etal.Nosocomial bloodstream infectious in United States hospitals：a three-year analysis[J].Clin infect Dis，2010，29（02）：239-244.
[4]黄建宝，孟燕妮，陈璐，陈艳萍.儿童迁延性肺炎111例临床分析[J].临床儿科杂志，2012，16（12）：1150-1152.
[5]潘贤春.综合疗法治疗儿童迁延性肺炎疗效观察[J].临床合理用药杂志，2014，17（16）：33-34.
[6]Bartlett NW， McLean GR， Chang YS， Johnston SL. Genetics and epidemiology：asthma and infection. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2011，9（5）：395-400.