线粒体自噬与线粒体途径凋亡相关蛋白在肺动脉高压肉鸡心肌中的表达

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengsanhua
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肉鸡肺动脉高压综合征也称作肉鸡腹水综合征,是目前较为常见的肉鸡营养代谢性疾病,该病的发生给我国肉鸡养殖行业造成严重的经济损失。研究发现,右心衰竭是肉鸡肺动脉高压发病过程的重要症状,且心肌线粒体在右心衰竭发生过程中出现了功能障碍。然而,关于禽类肺动脉高压发病过程中其心肌细胞线粒体是否发生自噬和线粒体途径凋亡的研究尚不多见。因此,本试验通过对肺动脉高压肉鸡心肌线粒体自噬与线粒体途径凋亡相关基因与蛋白进行检测,初步探讨肉鸡肺动脉高压过程中肉鸡心肌线粒体自噬与线粒体途径凋亡的变化,进一步探索肉鸡肺动脉高压发病机理。本试验选取120羽1日龄白羽肉鸡,随机分为2组,对照组30只,试验组90只。第20日龄时,试验组肉鸡通过翅静脉注射0.35 mL的CM-32离子交换纤维素悬液(含0.02 g/mL纤维素和150 U/mL肝素钠的生理盐水),对照组肉鸡通过翅静脉注射同体积的肝素钠生理盐水。饲喂至42日龄时对肉鸡进行麻醉处死,采集心脏。试验组肉鸡根据腹水指数分为亚临床组与发病组。光学显微镜观察心肌组织结构及病理变化,荧光定量PCR测定心肌组织线粒体自噬相关基因Parkin、PINK1、LC3-I、LC3-II、p62、NIX与线粒体途径凋亡相关基因Caspase3、Bak1、Bax、Bcl-2、CytC、p53 mRNA的表达变化。Western-Blot检测心肌组织中线粒体自噬相关蛋白LC3-II、p62、Parkin与线粒体途径凋亡相关蛋白Caspase3、CytC的表达。免疫组化检测心肌组织中线粒体自噬相关蛋白LC3-II、p62、Parkin的表达及定位。结果如下:(1)对照组心肌组织结构清晰,亚临床组出现心肌纤维变性,发病组心肌纤维变性严重,出现排列紊乱,并伴有出血与炎性细胞浸润。(2)与对照组相比,亚临床组和发病组肉鸡心肌线粒体自噬相关基因Parkin、PINK1、LC3-II、NIX mRNA表达水平和LC3-II/LC3-I、Parkin蛋白表达水平呈现升高趋势,并在发病组升高显著;p62、LC3-I mRNA表达水平呈现下降趋势;p62蛋白表达水平呈现下降趋势,并在发病组下降显著。(3)与对照组相比,亚临床组和发病组肉鸡心肌线粒体途径凋亡相关基因Caspase3、Bak1、Bax、CytC、p53 mRNA表达水平和Caspase3、CytC蛋白表达水平呈现升高趋势,且在发病组升高显著,而Bcl-2 mRNA表达水平在发病过程中呈现下降趋势。结果表明,心肌线粒体自噬和线粒体途径凋亡可能参与肉鸡肺动脉高压的发病过程。
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