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桦褐孔菌Inonotus obliquus (Fr.) Pilát又称“Chaga”。一直以来在北美、北欧等地作为传统医药被广泛应用。但桦褐孔菌人工驯化技术尚未成熟，野生资源的日益匮乏使桦褐孔菌的开发利用受到了限制。为进一步深入开发利用桦褐孔菌，本论文利用液体深层发酵所获得的胞外多糖、胞内多糖及发酵浸膏多糖作为实验材料，测定其中葡聚糖及甘露寡聚糖含量；测定体外人卵巢癌抗癌抑制率。从中选择桦褐孔菌胞外多糖进行进一步实验，通过对环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠及正常小鼠的体内试验，对桦褐孔菌胞外多糖的免疫机制进行探究。选择单一剂量考察实验周期对免疫功能的影响。并研究了桦褐孔菌胞外多糖对小鼠止咳化痰的作用影响。为功能食品和药品的进一步研究提供理论依据。实验结果如下：1、实验选取最为普遍认可的具有免疫活性的两种多糖即葡聚糖和甘露寡聚糖对桦褐孔菌胞外多糖、胞内多糖及发酵浸膏多糖进行含量检测，结果表明，桦褐孔菌胞外多糖中含0.1%微量的葡聚糖，胞内多糖中含葡聚糖82%，均不含甘露寡聚糖；桦褐孔菌浸膏多糖含20%，含甘露寡聚糖2%。2、实验采用桦褐孔菌三种多糖，即桦褐孔菌胞外多糖、胞内多糖及浸膏多糖进行体外抗人卵巢癌细胞实验，结果表明，胞外多糖对SKOV3人卵巢癌细胞抑制率分别为25.1%、29.0%、23.5%、18.0%和16.7%；桦褐孔菌胞内多糖不同剂量组抑制SKOV3人卵巢癌细胞增殖的抑制率分别为15.8%、28.6%、22.6%、17.8%和15.4%；桦褐孔菌发酵浸膏多糖不同剂量组抑制SKOV3人卵巢癌细胞的抑制率分别为15.4%、16.7%、18.7%、23.7%和28.6%。对于SKOV3细胞，桦褐孔菌三种多糖的最佳抑制浓度分别为50μg/mL、50μg/mL、400μg/mL。3、实验对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的脏器指数TNFα及IL2进行测定，同时进行淋巴增殖实验，实验中小鼠注射环磷酰胺后，模型组小鼠的胸腺指数及脾指数显著低于正常对照组，说明环磷酰胺使小鼠免疫功能受到明显抑制，免疫抑制模型形成。与模型组对比发现阳性对照组及桦褐孔菌胞外多糖高剂量组可极显著提高免疫抑制小鼠的胸腺指数(P<0.01)，中剂量组及低剂量组也可显著提高胸腺指数(P<0.05)。阳性对照组、桦褐孔菌高剂量组及低剂量组均可显著提高免疫抑制小鼠脾指数。实验发现，模型组与正常对照组相比小鼠血清中TNFα及IL2含量显著减少(P<0.01)。给予桦褐孔菌胞外多糖三个剂量的三个组小鼠血清中TNFα及IL2含量与模型组相比显著增加(P<0.01)，且随浓度升高TNFα及IL2含量也升高，呈一定剂量相关性。这些结果表明，给予桦褐孔菌胞外多糖能抑制环磷酰胺所致的小鼠血清中TNFα及IL2含量的减少。实验结果显示，与正常对照组相比，桦褐孔菌胞外多糖高剂量组对ConA诱导的正常小鼠脾淋巴细胞增殖能力有促进作用(P<0.05)，阳性对照组对ConA诱导的正常小鼠脾淋巴细胞增殖能力有明显促进作用(P<0.01)。桦褐孔菌中剂量组及低剂量组对正常小鼠脾淋巴细胞增殖能力有促进的趋势，但无统计学意义(P>0.05)。实验对灌胃给药14天后的正常小鼠进行脏器指数、细胞因子、淋巴细胞亚群及相关因子在肠道及嗜中性粒细胞中的表达进行测定，结果表明，在给药分别为500mg/kg,250mg/kg,125kg/kg的情况下，桦褐孔菌胞外多糖高剂量组及中剂量组能显著提高正常小鼠的胸腺指数(P<0.05)。低剂量组也可提高正常小鼠的胸腺指数，但无统计学意义(P<0.05);桦褐孔菌胞外多糖中、低剂量组均可在一定程度上提高正常小鼠脾指数，但无统计学意义(P>0.05)。研究表明，与阴性对照组相比桦褐孔菌胞外多糖中剂量组可极显著增加CD4+含量（P<0.01），同时可显著减少胞外多糖CD8+含量（P<0.05）。实验发现，桦褐孔菌胞外多糖高剂量组与阴性对照组相比，小鼠血清中TNF-α含量显著降低(P<0.05)。与阴性对照组相比，桦褐孔菌胞外多糖高剂量组显著降低了INFγ含量(P<0.05)。桦褐孔菌胞外多糖高剂量组显著提高了小鼠血清中CRP含量(P<0.05)。桦褐孔菌高中低三个剂量组对小鼠血清中IL6含量均无显著性影响(P>0.05)这些结果表明给予桦褐孔菌胞外多糖达到一定剂量时出现显著降低正常小鼠INFγ和TNF-α含量，并显著提高CRP含量。对IL6的影响则无统计学意义(P>0.05)。肠道样品结果显示，与对照组相比，桦褐孔菌胞外多糖高剂量组可显著提高IL-8R的mRNA表达量(P<0.05),桦褐孔菌高剂量组可显著提高CD62L(L-selectin)的mRNA表达量(P<0.05)。桦褐孔菌低剂量组可极显著提高IL6mRNA表达量。在对血液样品的研究中得出，和对照组相比，桦褐孔菌胞外多糖高剂量组可极显著提高CD62L(L-selectin)的mRNA表达量(P<0.01)，桦褐孔菌中剂量组可显著提高CD62L(L-selectin)的mRNA表达量(P<0.05)。进一步选择桦褐孔菌中剂量组(250mg/kg)进行28天的自由采食实验。实验结果显示，与对照组相比桦褐孔菌中剂量组可显著提高小鼠胸腺指数(P<0.05)；显著增加正常小鼠INFγ和TNF-α含量(P>0.05)，对IL6及CRP的影响则无统计学意义(P>0.05)；肠道样品结果显示，桦褐孔菌中剂量组可极显著提高IL-8R及IL6的mRNA表达量(P<0.01)。4、实验采用氨水引咳法和酚红分泌发观察桦褐孔菌胞外多糖的止咳祛痰作用，实验结果显示,与空白对照组比较,高剂量组及中剂量组桦褐孔菌胞外多糖可极显著延长氨水所致小鼠的咳嗽潜伏期(P<0.01)、减少咳嗽次数(P<0.01)。表明桦褐孔菌胞外多糖具有一定的止咳作用。实验结果显示,与空白对照组比较,高剂量桦褐孔菌胞外多糖可显著增加小鼠气管段酚红排泌量(P<0.01)。表明桦褐孔菌胞外多糖有一定的祛痰作用。