【摘 要】
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目的:对山东省部分地区先天性甲状腺功能减低症（Congenital hypothyroidism,CH）伴有甲状腺发育不全（thyroid dysgenesis,TD）的患儿进行HOXA5基因全编码区突变研究,从而探讨HOXA5与CH伴TD的关系,并通过进一步功能实验研究新发现突变的可能致病机制。方法:收集山东省内各地级市266例确诊CH伴TD患儿的血液标本,从外周血白细胞中提取全基因组DNA,聚
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目的:对山东省部分地区先天性甲状腺功能减低症（Congenital hypothyroidism,CH）伴有甲状腺发育不全（thyroid dysgenesis,TD）的患儿进行HOXA5基因全编码区突变研究,从而探讨HOXA5与CH伴TD的关系,并通过进一步功能实验研究新发现突变的可能致病机制。方法:收集山东省内各地级市266例确诊CH伴TD患儿的血液标本,从外周血白细胞中提取全基因组DNA,聚合酶链反应（PCR）扩增HOXA5基因的外显子区及外显子与内含子交界处100bp的区域,扩增产物用Sanger测序,并进行生物信息学分析。对新发现的两个突变（c.34C>G,p.R12G）和（c.337G>A,p.D113N）进行功能学研究,构建HOXA5野生型真核表达载体,用定点诱变技术表达2个突变体质粒后分别转染人甲状腺正常细胞（Nthyori-3.1）,培养24-72h后收集并裂解细胞,提取细胞总RNA和总蛋白,采用实时荧光定量PCR（q PCR）和Western Blot检测HOXA5m RNA和蛋白表达量差异。细胞增殖实验（CCK-8）、Transwell实验和划痕实验检测HOXA5突变体对人甲状腺细胞增殖和迁移能力的影响。结果:266例CH伴TD患儿中发现2例患者（0.75%）分别携带HOXA5 c.34C>G（p.R12G）和c.337G>A（p.D113N）2个新的杂合错义突变。生物信息学分析发现两个变异均位于蛋白保守区且都可能致病。进一步细胞功能学实验表明突变体c.337G>A（p.D113N）降低了HOXA5m RNA和蛋白表达水平,而突变体c.34C>G（p.R12G）抑制甲状腺细胞的增殖和迁移能力。结论:本研究对山东部分地区CH伴TD患者进行HOXA5基因筛查并发现2个杂合错义突变,表明HOXA5可能是CH伴TD的候选致病基因。细胞功能学实验显示c.337G>A影响HOXA5基因的转录和翻译,而c.34C>G抑制甲状腺细胞的正常增殖和迁移。因此两个突变体可能通过不同的作用机制而导致TD,具体仍有待进一步研究。
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研究背景:肝移植作为治疗终末期肝病的首选方法,近年来越来越面对着捐献器官短缺的困境,因此扩大供肝应用标准,将边缘供肝应用在肝移植手术中的方式逐渐被人们所接受。但是相比理想供肝来说,边缘供肝更容易受到缺血再灌注损伤的影响,通过各种方式减少缺血再灌注损伤对于边缘供肝移植后功能的恢复具有重要意义。Micro RNA作为长度约22个核苷酸的非编码单链RNA,在生物体体内起到重要的调节作用,在多项生命活动中
目的通过研究达芬奇心脏手术患者经股动脉、股静脉置管建立体外循环后,置管血管及周围组织的近中期恢复情况,探究达芬奇心脏手术中的体外循环技术可能导致的并发症问题。通过对达芬奇心脏手术后患者分组抗凝治疗,评估抗凝治疗是否具有临床意义,并进一步比较阿司匹林、华法林以及抗血栓压力泵的使用对下肢静脉血栓并发症的预防效果,进而为改善达芬奇心脏手术后患者的血栓并发症提供思路和策略。方法对在青岛大学附属医院心血管外
目的:肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤类型之一,恶性程度高,病程进展快,已成为全球第四大癌症致死病因,每年的发病率和死亡率都很高。作为一个受基因调控的、精细协调的选择性细胞存活和细胞凋亡的过程,自噬能够降解和回收利用不必要的和功能失调的细胞成分。自噬发生在各种恶性肿瘤细胞中,在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,研究自噬与肿瘤相互作用的机制具备重要意义。本研究通过自噬抑制剂氯喹（CQ）改变肝癌细胞的自噬
目的:缺血性脑卒中是全球范围内引起致残和死亡的重要原因。近来众多学者通过高通量测序技术研究发现长链非编码RNA（Long non-coding RNA,LncRNA）在缺血性脑卒中病理生理过程中发挥着无可替代的作用。SNHG17（Small nucleolar RNA host gene 17,SNHG17）参与结直肠癌相关血管新生,其能否参与缺血性脑卒中后血管新生有待进一步证实。本研究分别检测缺
目的:本研究旨在调查FGF3/FGF4/FGF19基因共同扩增在中国肝细胞癌（HCC）患者中的分布情况,探索HCC患者发生FGF3/FGF4/FGF19基因共同扩增与临床病理特征、预后之间的关系,进而为临床管理不同基因状态的HCC提供新思路。方法:本研究收集了2016年4月1日至2019年12月30日因HCC在青岛大学附属医院行根治性肝切除术且患者同意行二代基因测序的组织标本共253例,使用QIA
研究目的:本课题通过细胞分子生物学和体内动物实验,进行探索与验证缝隙连接蛋白α1（GJA1）如何介导下游靶点RALA,激活Hippo抑癌通路的内部信号传导,最终影响肝细胞癌（HCC）的进展。我们希望通过实验研究进一步阐明GJA1对HCC的生物学作用及HCC潜在的发展机制。研究方法:在本课题前期的研究中,我们已经证实GJA1在HCC组织中的表达具有显著差异,以及GJA1和HCC患者生存预后之间的关系
背景:肺癌是全球每年新发病例数最多、死亡人数最多的恶性肿瘤,尽管肺癌的治疗越来越多样化,但是死亡率仍然很高。及早地发现肿瘤并进行干预是改善肺癌预后的关键因素。随着高通量测序技术以及生物信息学的普及,越来越多的证据表明,环状RNA（circ RNA,circular RNA）在人类癌症的发生发展中发挥着不可忽略的作用。已有研究证明circ FBXW7可以减弱肿瘤的增殖和转移能力,减缓肿瘤的恶性进展。
目的:阐明基因间长链非编码RNA-重编码调控因子（Linc-ROR）对卵巢癌干细胞（OCSCs）特性调控的重要作用,进一步探讨卵巢癌来源外泌体（OCDE）介导Linc-ROR对卵巢癌干细胞样特性及肿瘤增殖、迁移和侵袭转移能力的影响。方法:（1）采用无血清悬浮培养法诱导A2780细胞生成OCSCs,通过成球实验、分化实验以及流式分析CD133+细胞率来鉴定是否具备干细胞特性,q RT-PCR检测Li
目的:计算机辅助手术系统三维重建技术已在成人肝脏外科术前指导中广泛应用。然而目前研究很少从计算机辅助手术系统三维成像与二维影像在儿童肝母细胞瘤术前规划进行具体的探讨。因此本研究目的是对比分析不同维度的影像学图像在小儿肝母细胞瘤术前规划的应用效果。方法:选取在青岛大学附属医院小儿外科从2016年1月至2019年10月行肝母细胞瘤手术切除的25例患儿,其中男16例,女9例。所有患儿术前均经B超引导下病
目的:随着人口老龄化的进展,神经退行性疾病在中老年人群中显得日益严峻,给病人照料者和家庭社会带来了严重负担。已知脑脊液颗粒蛋白前体（progranulin,PGRN）与多种神经退行性疾病有关,其作为神经系统小胶质细胞激活的反应,广泛参与了各种神经系统退行性疾病,比如额颞叶痴呆,阿尔茨海默病,帕金森病。已知在神经退行性疾病的各种临床表现中,睡眠障碍问题十分突出。Chen D W et al（2018