大豆（Glycine max）是世界上重要的粮油饲兼用作物,但近年来我国大豆进口量逐年飙升,国内大豆生产安全严重告急。间套作是提高大豆等作物产量的有效途径,对解决粮食危机具有极其重要的意义。但在间套作系统中,临近冠层或高位作物的遮荫会导致大豆受到荫蔽胁迫,严重影响了间套作下的大豆产量。植物对荫蔽胁迫的响应是一个非常复杂的过程。关于模式植物拟南芥的荫蔽调控机理已有大量详细的研究,大量的拟南芥蛋白被鉴定到通过表达水平和磷酸化水平参与避荫反应调控,而大豆作物在避荫反应中的分子机理仍不清楚。因此,为了研究荫蔽胁迫下大豆幼苗在蛋白分子水平上的早期应答情况,鉴定其响应荫蔽胁迫的差异表达蛋白及差异磷酸化蛋白,本研究以南032-4和南豆12两种不同基因型大豆为试验材料,通过表型分析筛选出荫蔽相对敏感的大豆基因型,通过蛋白组学及磷酸化蛋白组学筛选出了响应荫蔽胁迫的蛋白,并结合生理实验及q-PCR进一步分析了荫蔽胁迫对大豆幼苗糖代谢的影响。主要结果如下:1.在表型上,本研究分析了对荫蔽响应较为典型的两个大豆基因型（南032-4和南豆12）在荫蔽胁迫下的表型。与白光相比,荫蔽处理后,两个基因型的大豆幼苗都表现出明显的避荫反应表型,包括株高增加、叶柄伸长、节间长伸长等。但南032-4比南豆12具有更强烈的避荫反应,是比较研究大豆避荫反应的相对理想材料。2.为了筛选出参与大豆避荫反应的蛋白,本研究利用蛋白组学与磷酸化蛋白组学筛选了参与大豆避荫反应的早期响应的差异蛋白。白光和荫蔽处理Vc期大豆幼苗2小时后的差异蛋白组学结果显示,有29个蛋白显著上调表达、412个蛋白显著下调表达,这些蛋白主要定位于叶绿体和细胞质中。磷酸化蛋白组学获得了73个磷酸化上调蛋白、155个磷酸化下调蛋白,它们主要定位于细胞核、细胞质和叶绿体中,丝氨酸残基是其主要的磷酸化位点。值得注意的是,两个组学结果表明,大豆在荫蔽处理后,上调表达蛋白和上调磷酸化蛋白大多参与了大豆的糖代谢相关途径。3.为了进一步研究荫蔽胁迫对大豆幼苗糖代谢的影响,本研究通过生理实验进一步验证了避荫反应对大豆幼苗多种糖含量的影响。荫蔽处理后,南032-4及南豆12两个大豆基因型的多种糖含量（蔗糖、还原糖、可溶性总糖、淀粉）随着荫蔽处理呈减少的趋势。另一方面,q-PCR分析表明,荫蔽胁迫促进了糖代谢相关基因的表达。结果表明,大豆幼苗对荫蔽环境的响应较早,其通过不断增加糖代谢相关基因的表达加强糖类的代谢,导致荫蔽下糖含量的减少。4.针对筛选到的磷酸化差异蛋白,本研究进一步筛选了43个候选蛋白,并从大豆南032-4中克隆到了这43个差异蛋白的编码基因,将所有基因构建到了过表达载体后转化了拟南芥,并通过除草剂筛选得到了这43个基因的过表达拟南芥株系,为大豆避荫反应的进一步研究奠定了遗传及生化基础。本研究从农业生产中面临的实际问题入手,研究大豆幼苗对荫蔽的响应情况,筛选响应荫蔽胁迫的大豆蛋白,为作物密植或间套作相关研究提供参考依据。