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本论文以我国香蕉的主栽品种和重要种质资源:阿宽蕉(Musa itinerans Cheesm.)、贡蕉(Musa AA Pisang Mas cv.Mas)、过山香(Musa AAB Silk cv.Guoshanxiang)和巴西(Musa AAA Cavendish cv.Baxi)等品种为材料,研究了由三种不同外植体建立胚性细胞悬浮系的方法,对体细胞胚发生过程进行了组织学研究,并以玻璃化法对胚性细胞悬浮系进行了超低温保存的研究.以野生阿宽蕉未成熟合子胚(60 d)为外植体的研究表明,在愈伤组织诱导培养基(MS大量和微量元素及铁盐+Morel维生素+0.11 mmol/L KH<,2>PO<,4>+87mmol/L蔗糖+4.5 μmol/L2,4-D+1 g/LGelrite,pH 5.8)中诱导获得了黄色松散愈伤组织,诱导率为15.1﹪.从组织学的角度证明了该类愈伤组织为胚性愈伤组织,并经过2个月的悬浮培养建立了均质的ECS.通过体细胞胚发生途径获得了再生植株,再生频率为20.8﹪.以鲜食蕉贡蕉(AA)品种未成熟雄花序的第1~15位花梳为外植体的研究表明,在MI愈伤组织诱导培养基(MS基本培养基+不同浓度的2,4-D+4.1 μmol/L生物素+5.7 μmol/L IAA+5.4 μmol/L NAA+87 mmol/L蔗糖+7 g/L琼脂粉,pH5.8)中培养5~6个月后,可获得包括分生小球体和浅黄色、松散易碎的胚性愈伤组织在内的培养物.植物生长调节剂对贡蕉ECS的建立具有明显的调控作用.以我国香蕉主要栽培品种巴西蕉(AAA)和过山香(AAB)为外植体的研究表明,这两个品种的单个不定芽茎尖在P4培养基(MS基本培养基+100μmol/LBAP+1 μmol/L IAA )中均可诱导形成多芽体,但诱导多芽体所需的培养时间不同.以35 d为一继代周期,其中过山香需5个继代周期,巴西则需8个继代周期.对贡蕉胚性细胞悬浮系来源的体细胞胚发生和发育过程的组织细胞学研究表明,该途径的体细胞胚发生为单细胞起源.为使培养物胚性能有效地保持,贡蕉ECS通过玻璃化法被成功地超低温保存.ECS首先在含有0.5 mol/L蔗糖的半固体培养基中预培养24 h,培养物含水量由89.8﹪降低到76.2﹪.随后用50﹪PVS<,2>溶液预处理30-50 min,培养物含水量进一步被降低到60﹪.在0℃条件下PVS<,2>溶液脱水处理15 min使培养物含水量下降到33.6﹪.投入液氮中保存24 h后取出,40℃水浴中化冻2-3 min后,保存后的培养物被转移到半固体愈伤组织增殖培养基中恢复培养.TTC法测定表明培养物的存活率为43.5﹪.尽管保存后的细胞在开始再生长时有10-15 d的滞后期,鲜重生长量也只有对照的1/3左右,但经过2个继代周期(60 d)的培养后其生长能恢复到对照的水平.挑取恢复生长的细胞团转移到体细胞胚诱导培养基和悬浮培养液体培养基中培养可诱导体细胞胚的发生,并在2个月内重新建立了其ECS.