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家蚕是重要的经济昆虫,也是鳞翅目的模式昆虫。家蚕浓核病毒是蚕业生产上危害比较严重的一类病毒。目前为止在家蚕中共发现了3种浓核病毒,中国镇江株与DNV-2型相似,但是在血清学上存在差异。家蚕对BmDNV-1型的抗性由隐性单基因nsd-1和显性单基因Nid-1控制,它们之间相互独立。而家蚕对BmDNV-Z型的抗性由位于15号染色体的另一个隐性基因nsd-z控制。本论文从DNA入手利用RAPD技术筛选与抗性基因连锁的分子标记,并转换成SCAR标记,为分子标记辅助育种育种奠定基础。同时采用近等基因系结合荧光差异显示技术研究了家蚕对浓核病毒的抗性相关基因,其主要研究结论如下: 1.在抗DNV的品种秋丰d、高感品种华八35及其近等基因系BC6中,通过495个RAPD随机引物在各个品种的DNA混合样本中进行PCR扩增,获得了一个与家蚕抗DNV基因相关的分子标记S366。对这个标记进行了克隆、测序,并且根据序列设计特异引物转换成SCAR标记。在多个敏感性和抗性品种中进行验证,证明此分子标记真实可靠。通过生物信息学对测序片段进行分析,发现该片段序列与黄嘌呤脱氢酶基因有91%的同源性。黄嘌呤脱氢酶在先天性免疫系统中有很多细胞保护功能,暗示着黄嘌呤脱氢酶基因可能与家蚕抗DNV有某种联系。 2.通过荧光差异显示技术,在抗DNV的品种秋丰d、高感品种华八35及其近等基因系BC6中获得了与抗性相关的20多个特异条带。经过荧光定量PCR验证确认了一个与抗性相关的特异片段,5’-RACE获得了一个1096bp的全长序列。生物信息学分析后发现该基因是一