鸦胆子Brucea javanica(L.)Merr.是苦木科(Simaroubaceae)植物,在治疗阿米巴痢疾、疟疾、鸡眼和疣等疾病中广泛应用。鸦胆子苷(yadanzigan,YDZG)是鸦胆子中一类重要的有效成分,其结构为鸦胆子苦素E的2-β-D-葡萄糖苷(bruceine E-2-β-D-glucopyranoside)。目前对其生物活性的报道较少,未有关于鸦胆子苷抗炎活性的报道。本文通过体外构建炎症模型以及体内构建急性肺损伤模型来评价鸦胆子苷的抗炎活性,并探讨相关可能的机制。研究目的:通过体外细胞炎症模型以及体内急性肺损伤模型来研究鸦胆子苷的抗炎作用及其可能存在的机制。研究方法:体外实验中利用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7、J774A.1以及THP-1细胞建立炎症模型,通过ELISA、流式细胞术检测炎症因子的水平,利用免疫印迹试验、免疫荧光技术以及免疫共沉淀,研究NF-κB、氧化应激以及NLRP3炎性小体通路相关蛋白的表达;体内实验,使用LPS建立BALB/c小鼠急性肺损伤模型,通过死亡保护实验,呼吸机检测小鼠肺呼吸功能,血液分析仪检测小鼠白细胞、中性粒细胞的变化趋势,ELISA法检测肺组织、肺泡灌洗液以及血清中相关炎症因子的表达,HE染色检测肺组织病理水平变化,免疫印迹法检测相关蛋白表达等实验来研究鸦胆子苷的体内活性及其可能的机制。研究结果:1.鸦胆子苷对LPS诱导的炎症反应具有抑制作用巨噬细胞经过LPS刺激后,NO、IL-6和TNF-α的释放量明显上升,YDZG能够明显降低炎症因子的表达及释放,并且呈明显的量效关系。LPS诱导的p-IKKα/β表达被YDZG所抑制,且呈现剂量依赖性,而IκBα的表达提高,从而抑制了NF-κB的核易位。YDZG促进Nrf2由细胞质转移进入细胞核并且抑制ROS的产生。YDZG可以抑制NLRP3炎性小体激活,促进TRIM31的表达并促进TRIM31-NLRP3蛋白复合物的形成。2.鸦胆子苷对小鼠急性肺损伤具有抑制作用YDZG可以提高小鼠存活率,改善小鼠呼吸功能,缓解LPS对小鼠肺组织造成的明显实变、肺泡损坏萎陷挤压以及炎性细胞浸润,减少血液中白细胞以及中性粒细胞数量。并且可以减少LPS致ALI所造成的炎症因子IL-6、TNF-α高表达。进一步研究表明,YDZG可以减少ALI小鼠IL-1β、caspase-1 p20以及NLRP3的表达。结论:鸦胆子苷在体外可以通过调节NF-κB、氧化应激以及NLRP3炎性小体发挥抗炎作用;在体内,鸦胆子苷对LPS所致的小鼠ALI具有一定的防治作用,其作用机制不仅与调节TNF-α、IL-6及IL-1β等炎症因子表达,也与YDZG抑制炎性小体激活有关。