β-氨基丙腈对人骨肉瘤MG-63细胞的体外迁移、侵袭能力影响机制研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hellobaby54088
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究赖氨酰氧化酶(Lysyl oxidase,LOX)的抑制剂β-氨基丙腈(β-Aminopropionitrile,BAPN)对人骨肉瘤MG-63细胞体外迁移及侵袭的影响,并进一步研究BAPN对人骨肉瘤MG-63的MMP-2及MMP-9表达与其侵袭、迁移的相关性。方法:(1)取对数生长期人骨肉瘤MG-63细胞分为对照组及不同药物浓度梯度组(0.1mM、0.2mM和0.3mM BAPN作用于人骨肉瘤MG-63细胞),药物作用24h后倒置相差显微镜下观察细胞形态变化。(2)CCK-8法测定细胞增殖抑制率及半数抑制浓度。(3)Transwell方法检测BAPN对人骨肉瘤MG-63细胞迁移及侵袭情况。(4)RT-PCR检测BAPN对人骨肉瘤LOX基因及调控迁移、侵袭相关基因MMP-2和MMP-9表达水平。(5)Western Blot检测LOX、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结果:(1)以0mM、0.1mM、0.2mM、0.3mM、0.4mM药物浓度组分别作用于细胞24h后,倒置相差显微镜下观察到对照组、0.1mM、0.2mM、0.3mM药物浓度中大部分Mg-63细胞生长增殖良好,呈梭形或多角形,有少许细胞变圆、变小,细胞间距变大,密度减小;而0.4mM组中可见大部分细胞死亡,脱壁呈悬浮状,余细胞形态不规则,细胞质内有空泡及颗粒形成。因此将人骨肉瘤MG-63细胞分为实验对照组及三组不同的药物浓度组。(2)CCK-8法检测人骨肉瘤MG-63细胞的12h、24h、48h半数抑制浓度(IC50)分别为0.65mM、0.32mM、0.19mM,差异有统计学意义。(3)Transwell检测结果显示,与对照组相比,不同药物浓度组细胞迁移、侵袭能力增强,呈剂量依赖性。(4)RT-PCR检测结果分析显示,与对照组相比,不同药物浓度组中LOX基因mRNA表达量下调,而促迁移、侵袭作用基因MMP-2、MMP-9 mRNA表达量均明显增加(P<0.05)。(5)Western Blot检测结果分析显示,与对照组相比,不同药物浓度组中LOX蛋白表达量下降(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达量均明显增加(P<0.05)。结论:(1)BAPN能够增强人骨肉瘤MG-63细胞迁移及侵袭能力。(2)LOX可通过上调基因MMP-2和MMP-9表达增强人骨肉瘤MG-63细胞迁移及侵袭能力。
其他文献
《中国制造2025》提出的推进制造业创新发展是当前中国制造业发展的目标,作为制造业出口大国的中国,其制造业在中国总体出口贸易中具有非常重要的地位。但中国制造业在快速增
全球经济现在处于迅猛发展的阶段,对各种能源和资源的需求量不断增加,资源紧缺和环境恶化是全世界面临的两大重要难题。中国也不例外,能源和环境问题伴随着经济的发展也日渐突出。为缓解资源匮乏,改善社会环境,中国要始终以可持续发展作为社会经济增长和能源转型发展的重要目标,加大对新的清洁能源的开发力度,提高清洁能源的利用率,减少对环境的破坏,使我国经济和能源实现可持续的良性发展。本文基于多能互补系统理论,将各
自溶现象广泛存在于各类微生物中。本文通过不同碳源培养虎奶菇的方式对其进行诱导自溶,并运用差异蛋白质组学和代谢组学分析研究其自溶机制。1.利用不同碳源培养虎奶菇的方
研究背景基因拷贝数变异(copy number variation,CNV)是指人类基因组DNA片段大小范围从kb到Mb的亚微观突变,主要表现为缺失或重复。CNV的形成机制主要包括DNA重组与DNA错误复
我国柴油机车排放的大量的氮氧化物(NO_x)和颗粒物(soot),不仅污染大气环境而且危害人体健康。随着国家对排放标准的要求日益严格,汽车行业对尾气后处理技术也有着迫切的需求。机外后处理技术中,在催化剂的作用下同时去除NO_x和soot具有节约能源、缩小体积等优点,然而其关键在于获取高效催化剂。钙钛矿型氧化物对去除NO_x和soot具有良好的催化活性,再通过优选制备条件和取代部分元素等技术手段,可
目的:骨关节炎中关节软骨的进行性退变是其的主要原因,在关节软骨中Cx43表达上调,研究显示Cx43在滑膜细胞中影响着MMPs的分泌水平。本实验拟通过siRNA转染靶向抑制Cx43的表达
写作教学是语文教学的重要一环,义务教育第一学段的写话教学作为写作教学的起点,对学生后续的写作学习影响颇大。本研究以河南省太康县城关镇实验小学为研究对象,从问题、原因和对策三个方面,对该校的写话教学做出了系统的分析与研究。本研究把写话教学定义为“在义务教育第一学段中,教师引导学生学习运用书面语言表情达意的语文教学活动”,概括出了写话教学的基础性、直观性和综合性三个特点。基础性体现在写话教学对学生学习
近年来随着高速公路绿化保养频次增加,交通事故屡发,给作业个人及养护公司带来不可估量的损失。现有养护方式道路封闭时间长,修剪效率低,无法满足现有的绿化养护要求。本文按
自从二十世纪七十年代起,外语教学研究的重心从如何教授逐渐转变为如何学习。学习者的个体因素如学习策略、学习动机、学习者的智力等引起越来越多的研究者的关注。想要真正
Pti(Pto-interacting protein)为Pto互作蛋白,参与植物病原防御和非生物胁迫,但是它的的具体机制并不是很清楚。在这里我们从辣椒cDNA文库中分离出了基因CaPti1,它编码354个