自溶现象广泛存在于各类微生物中。本文通过不同碳源培养虎奶菇的方式对其进行诱导自溶,并运用差异蛋白质组学和代谢组学分析研究其自溶机制。1.利用不同碳源培养虎奶菇的方法对其进行了诱导自溶,同时开展了相关条件的优化,结果表明,以先葡萄糖后玉米淀粉的培养模式进行诱导培养,在缓冲体系pH为7,40℃保温8h的条件下,虎奶菇发生了强烈的自溶现象。2.比较了虎奶菇菌丝蛋白的几种提取方法,结果表明苯酚法提取所得到的蛋白质样品的双向电泳效果最好。于是采用该方法提取不同碳源培养的虎奶菇的蛋白并进行差异蛋白质学研究。3.差异蛋白组学分析结果发现,在3种不同碳源培养模式下虎奶菇自溶过程共有6种与能量代谢相关蛋白,9种与核酸代谢相关蛋白,8种与蛋白代谢相关蛋白、15种与物质运输和信号转导相关蛋白、6种与物质代谢相关蛋白出现了差异表达。对相关蛋白的分析发现,不同碳源培养模式主要是通过碳水化合物的合成来影响虎奶菇自溶的程度。在先葡萄糖后玉米淀粉的培养模式下,虎奶菇受到温度、可用单糖的制约,其自溶相对剧烈,多条信号转导途径增强。该处理下生物大分子合成受到了较大的促进,有助于提高对环境的耐受程度。在先玉米淀粉后葡萄糖的培养模式下,虎奶菇对碳源的利用情况从原先的利用玉米淀粉转变为利用葡萄糖(单糖),该处理下虎奶菇自溶相对平缓,大部分生物膜功能得以保持。而以葡萄糖为单一碳源的培养模式下,虎奶菇原有利用碳源的模式没有发生变化,自溶情况几乎只受温度影响。因此信号转导途径多为热休克相关。4采用了代谢组学方法对不同碳源培养的虎奶菇自溶情况进行了研究。共鉴定得到22种物质,其中在先葡萄糖后玉米淀粉的培养模式下,单糖种类和相对数量均有所上升。综上所述,推测不同碳源培养模式下虎奶菇自溶机制:在可用单糖不足的情况下,细胞正常新陈代谢平衡被打破,随后响应外界环境变化,合成糖苷酶和蛋白酶,部分信号通路表达,共同作用对细胞壁多糖和部分细胞质成分进行降解,菌体随之开始自溶。自溶获得的单糖等营养物质用于糖酵解,在ATP能量供应下合成各类生物大分子,并组装成新的细胞或对原有细胞进行修补。当新细胞合成反应速度快于自溶反应速度时,虎奶菇正常生长。