【摘 要】
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目的偏头痛是一种发作性的神经疾病,全球发病率约15%。此病发作表现以一侧头部的搏动性疼痛为主,可伴随消化道症状,患者对光线、声音等刺激的敏感性升高,严重发作可造成患者失能,给社会和患者带来沉重负担。然而,现有的干预手段并不能根治偏头痛,认识其具体发病机理仍需大量的研究。随着偏头痛机制研究的深入,三叉神经血管系统（trigeminovascular system,TGVS）传导通路的激活与敏化被认为
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目的偏头痛是一种发作性的神经疾病,全球发病率约15%。此病发作表现以一侧头部的搏动性疼痛为主,可伴随消化道症状,患者对光线、声音等刺激的敏感性升高,严重发作可造成患者失能,给社会和患者带来沉重负担。然而,现有的干预手段并不能根治偏头痛,认识其具体发病机理仍需大量的研究。随着偏头痛机制研究的深入,三叉神经血管系统（trigeminovascular system,TGVS）传导通路的激活与敏化被认为是偏头痛疼痛的主要机制。基于五羟色胺在TGVS中的作用机理,第一种偏头痛特异性药物曲普坦类药物得以研发应用;近年,降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）在TGVS的激活与敏化中的重要地位得到确认,已成为新的偏头痛治疗靶点。针刺作为一种常用的镇痛干预手段,对偏头痛具有良好的控制作用。然而,针刺干预偏头痛的作用机理尚不清楚。本研究探索电针风池对TGVS传导通路三级神经元中CGRP与CGRP受体相关的通路蛋白磷酸化PKA（pPKA）和磷酸化CREB（pCREB）的影响研究;从而探索电针风池干预偏头痛的内在机理。方法1、动物分组:雄性SD大鼠被随机分为4组:对照组、模型组、风池电针组、非穴电针组（实验一每组10只,实验二每组5只）。2、造模方法:本实验采用电刺激上矢状窦区硬脑膜的偏头痛大鼠模型。具体造模方法:巴比妥钠麻醉大鼠后,将其头部固定于大鼠脑立体定位仪上;暴露颅骨,在颅骨正中线上钻取两个颅孔（前孔位于前囟前4mm,后孔位于前囟后6mm）。将一对刺激电极分别安装于前后颅孔,经螺丝固定后用牙科水泥覆盖,恢复期过后对大鼠进行电刺激造模。3、处理方法:对照组:只安装刺激电极,不进行电刺激造模;模型组:进行电刺激造模;风池电针组:电刺激造模之后,予以电针干预,穴位为双侧风池;非穴电针组:电刺激造模之后,予以电针干预,穴位为非穴位点;4、检测指标及方法采用电子von-frey测定偏头痛模型大鼠头面与后足底机械痛阈值,使用放射性免疫法检测颈静脉血中CGRP含量,蛋白免疫印迹法和免疫荧光技术对CGRP进行检测,CGRP受体下游通路蛋白pPKA与pCREB由WB进行检测。结果1、行为学改变:头面机械痛阈:模型组头面部痛阈明显低于对照组（p＜0.001）;非穴电针组与模型组无明显差异（p＞0.05）;风池电针组痛阈值高于模型组,且差异显著（p＜0.001）;后足机械痛阈:模型组后足底痛阈明显低于对照组（p＜0.001）;非穴电针组与模型组无明显差异（p＞0.05）;风池电针组痛阈值高于模型组,且差异显著（p＜0.05）。2、颈静脉血中CGRP含量:与对照组比较,模型组的颈静脉血中CGRP水平明显升高（p＜0.001）,与模型组相比,风池电针组颈静脉血中的CGRP水平显著降低（p＜0.001）,非穴电针组与模型组无显著差异（p＞0.05）。3、TGVS三级神经元内CGRP蛋白表达的改变:WB研究结果表明:与对照组比较,模型组的TG/TNC/VPM内CGRP蛋白含量明显上升（p＜0.001）;与模型组比较,风池电针组的TG/TNC/VPM内的CGRP含量明显低于模型组（p＜0.05）;与风池电针组相比,非穴电针组的TG/TNC/VPM内CGRP蛋白含量明显高于电针组（p＜0.05）;模型组与非穴电针组无显著差异（p＞0.05）。免疫荧光结果表明:电刺激显著升高TG内CGRP阳性细胞数目（p＜0.01）,电针风池显著降低TG内CGRP阳性细胞数目（p＜0.01）。4、pPKA与pCREB:与对照组比较,模型组在电刺激后TG区域的pPKA与pCREB水平显著升高（p＜0.05）,电针风池可显著降低电刺激后TG内的pCREB水平（p＜0.05）。结论1、电针风池可有效抑制偏头痛大鼠电刺激后机械痛阈值降低;2、电针风池可以显著降低TGVS传导通路三级神经元中的CGRP水平,可抑制CGRP在TG内的表达;3、电针风池可抑制TGVS传导通路三级神经元部分TG内pCREB水平;4、电针风池可降低TGVS传导通路三级神经元内的CGRP水平,并抑制TG内pCREB水平可能是电针风池治疗偏头痛的作用机制之一。
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