社区糖尿病人群金黄色葡萄球菌及MRSA携带现况、耐药谱与分子特征研究

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目的了解社区糖尿病人群金黄色葡萄球菌和MRSA的携带情况,并分析其携带的危险因素,探讨菌株的耐药谱及分子特征,为预防和控制该人群金黄色葡萄球菌和MRSA菌株的携带和感染提供科学的依据。方法根据横断面的研究设计,采用等比例概率抽样的方法调查佛山市里水镇11个社区的糖尿病患者,并选取同社区的未患糖尿病者作为对照人群;采用自行设计的调查问卷收集调查对象的相关信息并进行鼻拭子采样,根据标准的微生物实验方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,采用头孢西丁纸片扩散法和mec A基因扩增法鉴定MRSA菌株,应用χ2检验及Fisher确切概率法与logistic回归等方法分析糖尿病人群携带金黄色葡萄球菌和MRSA的危险因素;应用K-B纸片扩散法分析金黄色葡萄球菌的耐药谱;利用PCR技术检测金黄色葡萄球菌的PVL基因,采用多重PCR方法测定MRSA菌株的SCCmec分型;采用MLST方法分析金黄色葡萄球菌分子分型。结果基本情况:本研究共调查了糖尿病人群529人,其中男性161人(30.43%),平均年龄为(66.13±9.34)岁;对照人群427人,其中男性181人(42.39%),平均年龄为(64.39±9.45)岁。携带现况及其危险因素:糖尿病人群中,46人携带金黄色葡萄球菌,携带率为8.70%;22人携带MRSA,携带率为4.15%;对照人群中,25人携带金黄色葡萄球菌,携带率为5.85%;12人携带MRSA,携带率为2.81%。两人群金黄色葡萄球菌携带率与MRSA携带率差异无统计学意义(P=0.096与P=0.989)。男性糖尿病人群更不易携带金黄色葡萄球菌(OR=0.45,95%CI:0.20-0.99),血糖控制达标者携带金黄色葡萄球菌的风险是未达标者的2.04倍,未发现MRSA携带的相关危险因素。药物敏感实验:金黄色葡萄球菌对11种抗生素均有不同程度的耐药。MRSA对头孢西丁、红霉素、复方新诺明、莫西沙星和克林霉素耐药率明显高于MSSA(P<0.05),两者对其余抗生素耐药率相近,未发现MSSA对利奈唑胺耐药。金黄色葡萄球菌多重耐药率为43.66%,MRSA的多重耐药率高于MSSA,两者差异具有统计学意义(P=0.014)。糖尿病人群和对照人群对替考拉宁和红霉素耐药率差异具有统计学意义(P<0.05)。糖尿病人群携带的金黄色葡萄球菌多重耐药率为52.17%,对照人群为28.00%。PVL基因检测:71株金黄色葡萄球菌中共检出10株携带PVL基因,检出率为14.08%,其中MRSA 6株(17.65%,6/34),MSSA 4株(10.81%,4/33),两者PVL携带率差异无统计学意义(p=0.504)。糖尿病人群和对照人群金黄色葡萄球菌中各有5株携带PVL基因,携带率分别为10.87%(5/46)和20.00%(5/25),两者携带率差异无统计学意义(P=0.307)。SCCmec分型:34株MRSA中,SCCmecⅠ型1株(2.94%)、SCCmecⅡ型4株(11.76%)、SCCmecⅢ型5株(14.71%)、SCCmecⅣ型13株(38.24%)和SCCmecⅤ型5株(14.71%),6株不可分型(17.64%)。根据SCCmec分型可知34株MRSA中共检出10株HA-MRSA和18株CA-MRSA。MLST:71株金黄色葡萄球菌中共发现30个ST型别,其中主要型别是ST398(9/71,12.68%),其次是ST7(8/71,11.26%)、ST59(5/71,7.04%)和ST72(5/71,7.04%)。对ST型别进行聚类共发现两个克隆群(CC45和CC59),6个成对体(D5、D7、D72、D88、D398和D2483),10个单体(ST1、ST6、ST9、ST10、ST25、ST30、ST188、ST944、ST946和ST1937)。通过e BURST软件分析,30个ST型别分别属于11个国际克隆群。CC5是主要的克隆群(28/71,39.44%),其次是CC398(11/71,15.49%)、CC7(9/71,12.68%)和CC59(9/71,12.68%)。糖尿病人群与对照人群携带的金黄色葡萄球菌来源并无多大区别。结论社区糖尿病人群与对照人群金黄色葡萄球菌及MRSA携带率差异无统计学意义。女性、血糖控制达标者是糖尿病人群携带金黄色葡萄球菌的独立危险因素。本研究MRSA的耐药率普遍高于MSSA,两者多重耐药率都较高。金黄色葡萄球菌中存在一定比例的PVL阳性菌株,MRSA菌株以CA-MRSA为主,HA-MRSA并存。金黄色葡萄球菌ST型别复杂多样,与国际流行菌株存在密切联系。
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