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先兆性流产是家猫妊娠失败主要原因之一,目前,国内外主要采用激素和抗生素进行防治。但近年来,激素和抗生素滥用带来的胚胎畸形、不孕不育等毒副作用日益凸显。因此,安全有效的保胎产品对降低家猫流产率,保障优良品种的繁育具有重要的临床应用价值。本文探究了白术内酯Ⅰ（AtractylenolideⅠ,AT-Ⅰ）对先兆流产家猫的保胎效果,以期为家猫先兆性流产的防治奠定试验基础和理论依据。具体研究内容如下:（1）AT-Ⅰ一般毒性和靶动物安全性试验研究急性毒性试验:60只小鼠,随机分为5组,每组12只,第1～4组分别给予6000、4800、3840和3072 mg/kg的AT-Ⅰ,对照组给予等量纯净水。10 d内,观察有无中毒和死亡,计算半数致死量(LD50);另取昆明小鼠20只,随机分为2组:试验组给予0.2 g/m L AT-Ⅰ药液,18 h内灌服3次,每次0.8 m L;对照组给予等量纯净水,饲养7 d,计算最大耐受量（MTD）和耐受倍数。亚慢性毒性试验:24只SD雌性大鼠随机分为低、中、高剂量组和对照组（6只/组）,分别给予1200、2400和4800 mg/kg/d的AT-Ⅰ,对照组给予等量纯净水,连续灌胃30 d,每日记录各组大鼠临床体征。第31 d,称重、采血,进行血液学检测,剖检观察并制作病理切片。靶动物安全性试验:20只2-5岁雌性家猫,随机分为4组（5只/组）,低、中、高剂量组分别给予2.6、7.8、13 mg/kg/d AT-Ⅰ胶囊,空白对照组给予空胶囊,连续7d,每日观察各组家猫食欲、精神状态及排便情况,第8 d进行静脉采血,检测血液学指标。结果表明,急性毒性试验无小鼠死亡,LD50>6000 mg/kg,MTD为24 g/kg,表明该AT-Ⅰ无明显毒性。亚慢性毒性试验中,各组大鼠生长发育情况、血常规指标、脏器系数与对照组无显著性差异（P>0.05）;中、高剂量组与低剂量组、对照组相比,血清总胆固醇含量显著下调（P<0.05）,其余指标无显著性差异（P>0.05）;病理学结果显示,高剂量组大鼠主要组织器官无明显异常。靶动物安全性试验中,各组家猫精神状态、被毛光泽度、粪便情况无异常,血液学指标与对照组相比差异不显著（P>0.05）。（2）AT-Ⅰ对先兆流产小鼠模型的保胎效果研究将60只妊娠3 d的小鼠随机分为:正常妊娠组（CON,n=10）、先兆流产模型组（MOD,n=10）、黄体酮组（PRO,n=10）、AT-Ⅰ低、中、高剂量组（AT-L,AT-M,AT-H,n=10）。妊娠第4 d开始灌胃给药,连续5 d。妊娠第9 d,除CON组外,其余各组均给予米非司酮11.62 mg/kg,建立先兆流产小鼠模型。第14 d称重后处死小鼠,剖检观察胚胎着床数及胎儿发育情况;ELISA法检测小鼠血清中PGF2α、P4及E2含量变化;HE染色观察小鼠卵巢黄体数目及相对面积;RT-q PCR法检测小鼠卵巢组织中St AR m RNA表达情况;免疫组化法检测小鼠卵巢组织中St AR含量与分布情况。结果显示,MOD组子宫无胚胎附着,血清中PGF2α含量显著上升（P<0.05）,P4及E2含量显著降低（P<0.05）,卵巢黄体发育不良,St AR表达显著下调（P<0.05）;AT-H可以提高胚胎着床率（P<0.05）,降低PGF2α含量（P<0.05）、升高P4含量（P<0.05）,促进卵巢黄体发育,St AR的表达量与CON组无显著差异（P>0.05）。表明AT-H可以促进妊娠黄体发育,提升血液中P4水平,从而缓解先兆流产带来的不良影响,降低流产率。（3）AT-Ⅰ对先兆流产家猫模型的保胎效果研究建立了先兆流产家猫模型。分别将1、3、6 mg/kg阿来司酮（Aglepristone,AGL）用于妊娠早期家猫,根据临床体征、孕囊张力及胎心活力、阴道抹片、血清孕酮水平,筛选出构造家猫先兆流产模型的最佳剂量。20只妊娠早期家猫共随机分为:正常妊娠组（CON,n=5）、先兆流产模型组（MOD,n=5）、黄体酮组（PRO,n=5）、白术内酯组（AT-Ⅰ,n=5）。妊娠第19 d按剂量口服给药,连续6 d,妊娠第25 d,除CON组外,其余各组给予3 mg/kg AGL,观察各组家猫临床体征;超声监测孕囊张力、胎心活力,每5 d进行一次,直至妊娠结束,记录最终活胎数。妊娠第28 d,采集家猫血清,ELISA法检测PGF2α、P4、E2及LH含量;通过LC-MS非靶代谢组学检测技术对MOD组和AT-Ⅰ组进行代谢组学分析。结果显示:3 mg/kg AGL组胎儿孕囊张力不佳,胎心活力下降,阴道抹片可见较多红细胞及炎性细胞,血清P4低于维持妊娠所需孕酮的平均值,符合先兆流产判定标准,可用作家猫先兆流产模型。与MOD组相比,AT-Ⅰ组家猫腹痛不安等状态有所改善、食欲增加,血清中P4、LH含量显著升高（P<0.05）、PGF2α含量显著降低（P<0.05）,孕囊张力良好,胎心活力保持较高水平,活胎率显著提升（P<0.05）。代谢组学结果提示,AT-Ⅰ处理组脂质代谢水平显著增强。因此推测AT-Ⅰ通过调节脂质代谢改善黄体功能、上调孕激素水平、促进胎儿发育从而对家猫先兆流产起到预防和治疗的效果。（4）AT-Ⅰ对家猫卵巢颗粒细胞（FOGCs）雌孕激素分泌的影响及转录组学研究培养原代家猫卵巢颗粒细胞,通过形态学观察和FSHR受体特异性免疫荧光染色进行鉴定。采用CCK-8方法测定FOGCs的生长规律和生长曲线及AT-Ⅰ作用FOGCs的时效和量效曲线。ELISA法检测AT-Ⅰ对FOGCs雌孕激素分泌量的影响。采用RNA-seq测序技术对FOGCs对照组和AT-Ⅰ作用的FOGCs组进行转录组学分析。结果显示,测序共获得137个差异表达基因（Differentially expressed genes,DEGs）,其中49个DEGs显著上调,88个DEGs显著下调。GO（Gene Ontology）富集性分析结果显示,在整个分化过程中共富集52个GO term。KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）富集性分析结果显示,差异表达基因成功注释到155个信号通路,其中有23个差异显著性信号通路（P<0.05）。GO和KEGG富集性分析获得与AT-Ⅰ促进FOGCs增殖及激素分泌过程相关的差异显著性信号通路为胆固醇代谢过程和卵巢类固醇激素合成信号通路（P<0.05）。RNA-seq测序结果通过RT-q PCR方法和生化分析方法进行验证。通过本研究主要得到以下结论:（1）AT-Ⅰ无明显急性毒性,家猫按临床推荐剂量使用是安全可靠的。（2）AT-Ⅰ通过调节脂质代谢改善黄体功能,对小鼠和家猫先兆流产起到预防和治疗的效果。（3）基于RNA-seq测序技术对AT-Ⅰ的作用机理进行探究,获得与AT-Ⅰ促进FOGCs雌孕激素分泌相关的主要信号通路为胆固醇代谢通路和卵巢类固醇激素生成通路。