【摘 要】
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乳腺癌是一种致命的恶性肿瘤,其发病率呈逐年上升趋势。化疗是治疗乳腺癌的重要手段之一,但在接受化疗时,乳腺癌患者需要面对化疗带来的毒副作用,导致患者治疗依从性差。因此,迫切需要开展研究以发现疗效更好地治疗方案。携带多种药物和si RNA的纳米递送系统具有挑战性,在文献中很少见。因此,多种药物与si RNA之间的抗癌功效和协同作用对于研究至关重要。本文利用阳离子脂质体（CTL）将紫杉醇（PTX）、克唑
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乳腺癌是一种致命的恶性肿瘤,其发病率呈逐年上升趋势。化疗是治疗乳腺癌的重要手段之一,但在接受化疗时,乳腺癌患者需要面对化疗带来的毒副作用,导致患者治疗依从性差。因此,迫切需要开展研究以发现疗效更好地治疗方案。携带多种药物和si RNA的纳米递送系统具有挑战性,在文献中很少见。因此,多种药物与si RNA之间的抗癌功效和协同作用对于研究至关重要。本文利用阳离子脂质体（CTL）将紫杉醇（PTX）、克唑替尼（CRI）和BclxL siRNA三种药物共同包载后递送,联合治疗乳腺癌。首先采用（2,3-二油酰基-丙基）-三甲胺（DOTAP）和二油酰磷脂酰乙醇胺（DOPE）这两种磷脂材料制备了3种摩尔比（DOTAP:DOPE）的阳离子脂质体（M 1:1、M 1:2、M 1:3）。阳离子脂质体的粒径均在130 nm左右,多分散系数（PDI）＜0.3,显示出良好的分布,Zeta电位均在54 m V左右。然后通过MTT实验和细胞转染实验筛选出细胞毒性低以及转染效率相对较高的阳离子脂质体M 1:1。在此基础上,使用M 1:1对克唑替尼和紫杉醇进行包载,制备克唑替尼和紫杉醇共载药阳离子脂质体（CRI-PTXCTL）。CRI-PTX-CTL的粒径为（138.63±1.53）nm,PDI＜0.3,显示出良好的分布,Zeta电位为（50.9±0.3）m V;CRI-PTX-CTL在形状上呈球形,并均匀分散。通过MTT和细胞凋亡实验分析了克唑替尼和紫杉醇之间的相互作用。CRI-PTXCTL具有最高的细胞毒性,高于其他药物溶液组和脂质体制剂组;Annexin V-FITC/PI双重染色在CRI-PTX-CTL中显示了早期和晚期凋亡细胞的最高百分比（76.7%）。通过琼脂糖凝胶电泳实验证实了阳离子脂质体具有较好的核酸吸附能力;倒置荧光显微镜观察阳离子脂质体所包载的克唑替尼、紫杉醇和si RNA可以有效的被乳腺癌细胞摄取,进一步测得CTL-si RNA能够有效地抑制细胞内Bclx L的表达。最后,在体外实验中,通过MTT法测定了CRI-PTX-CTL-si RNA体外抑制肿瘤细胞生长活性,阳离子脂质体递送的Bcl-x L si RNA和CRI-PTX在体外显示出增强的细胞毒性作用。综上,本研究证明CRI-PTX-CTL-siRNA递送系统具有提高治疗乳腺癌的潜力,为乳腺癌的治疗提供了一个新的策略。
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