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肢带型肌营养不良症(limb-girdle muscular dystrophy, LGMD)是一组以四肢近端肌无力为主要临床表现、具有遗传异质性的肌肉疾病,依据遗传方式的不同可分为常染色体显性遗传(LGMD 1型)及常染色体隐性遗传(LGMD 2型)两大类,目前报道共21种。在世界的大部分地区,LGMD 2型中发病率最高的是LGMD2A,此类肌营养不良症起病于青少年,单凭临床症状很难鉴别,必须依赖分子学或蛋白质组学研究手段方能确诊。肢带型肌营养不良2A型(LGMD2A)是由钙依赖的中性半胱氨酸蛋白酶calpain-3病变所引起的一种肌肉发育不良疾病,在中国人群中尚无相关报道。其致病基因CAPN3位于15q15.1-q21.1,是一个包含24个外显子的基因片段,目前还没有发现突变热点,从而使分子诊断显得相对困难且耗费巨大。Calpain-3存在于骨骼肌肌细胞中,肌肉活检组织行免疫组化染色后深染部分均在胞浆中,不利于分析和比较。而选择免疫印迹法检测calpain-3蛋白的表达,费用相对较低,且可对该蛋白进行半定量检测,从而建立LGMD2A的诊断。再回顾并分析此类患者的资料,以发现其共有的临床特点及病理表现。为研究中国人群中LGMD2A患者的临床及病理特点,本文共划分为两大部分。第一部分内容主要为采用联合免疫印迹法诊断LGMD2A:从我科2006年-2010年间建立的肌肉标本库中依据一定的入选条件选择93例肌肉样本行免疫组化染色。为除外dysferlin蛋白病变继发calpain-3缺失,故采用联合免疫印迹法同时检测Calpain-3及dysferlin蛋白表达情况。在93例入选患者中,18例患者肌肉样本中calpain-3表达完全缺失(13例)或明显降低(5例),但dysferlin表达完好或轻度减少,故诊断为calpainopathy (LGMD2A)。36例患者在免疫印迹检测中发现dysferlin蛋白存在“显著减少”或“完全缺失”,而同时他们的calpain-3表达完好或轻度减少,故诊断为dysferlinopathy,其中30例为LGMD2B。在拟诊为“肢带型肌营养不良症”的63例患者中,依据免疫印迹诊断结果,经典型LGMD2A占所有肢带型肌营养不良的29.0%(17/63),剩余1例不典型的LGMD2A患者表现为远端肌无力,而LGMD2B占47.6%(30/63)。第二部分内容为回顾并分析18例LGMD2A患者的临床及病理特点：男女比例为1：1,平均发病年龄为18.8岁,其伸髋肌力较其它组肌群明显降低,与肌肉核磁共振(MRI)结果相匹配；其中14例(77.8%)伴随双侧翼状肩(12例对称,2例不对称)；12例(66.7%)伴随跟腱挛缩,其中1例还合并双侧肘关节挛缩。LGMD2A患者的病理结果显示：所有标本均呈“肌营养不良样”改变,12例(66.7%)肌肉切片中发现“分叶状纤维”,8例(55.6%)存在“轮状纤维”。本研究首次在国内探索联合免疫印迹法在LGMD2A型和2B型诊断中的应用,讨论此方法与其它诊断方法相比存在的优势。旨在初步揭示中国人群LGMD2A型患者的临床特点及病理表现,为临床诊断提供一些线索。