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背景原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG))是一类青光眼,其典型特征在于房角开放状态下、眼压持续地增高,从而造成视神经的损害,其发病机制还不十分明确,目前已知的危险因素中,以小梁网组织外的细胞外基质堆积为主要致病原因。目前多篇文献报道,在POAG患者眼部房水中,白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量较正常人偏低,而此种变化对POAG产生了何种影响并无报道。目的探讨同源下不同浓度的外源性IL-6刺激下体外培养的牛眼小梁细胞中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达变化,为POAG早期诊断及开创新疗法提供依据。方法采用改良式组织块培养法采取新鲜牛眼的小梁网组织,经胰蛋白酶消化并传代,从中提取并培养第三代牛眼小梁细胞,采用细胞形态学对细胞进行鉴定。将第3代牛眼小梁细胞接种于6孔细胞培养板,待细胞铺满后,加入不同终浓度(0ng/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml)IL-6 培养基,继续培养 24h。采用荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测各浓度培养基培养下牛眼小梁细胞中FN mRNA的相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法(western blot)检测各浓度培养基培养下牛眼小梁细胞中FN蛋白的相对表达量。结果培养出的牛眼小梁细胞呈长梭形或多边形,经贴壁细胞消化传代法培养小梁细胞至第三代,倒置生物显微镜下可见细胞内含少许色素颗粒,形态符合文献记载的第三代牛眼小梁细胞形态特征。实时荧光定量PCR法显示,在终浓度为Ong/ml、0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/mIIL-6培养基下所培养的牛眼小梁细胞所产生的 FN mRNA 量为 1.000±0.000,0.213±0.004,0.056±0.001,0.019±0.002,呈下调趋势,实验组(0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml)与对照组(0ng/ml)间差异具有统计学意义(实验组与对照组及对照组两两之间均P<0.05,图2);蛋白质免疫印迹法显示,在上述浓度IL-6刺激下FN蛋白相对表达含量为1.167±0.012、0.662±0.009、0.238±0.011、0.061±0.011,呈下调趋势,实验组(0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml)与对照组(0ng/ml)间差异具有统计学意义(实验组与对照组及对照组两两之间均P<0.05,图3,4)。结论体外培养的牛眼小梁细胞在外源性IL-6刺激下影响了 FN基因与蛋白的表达,浓度与蛋白表达呈负相关性,POAG患者房水及血液中IL-6浓度水平较正常人降低,FN蛋白表达较正常人增高,从中我们推测IL-6通过影响FN基因与蛋白表达、改变小梁网组织结构的方式参与了 POAG的发病过程并对其进展产生了影响。