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磷酸腺苷蛋白激酶(AMPK)介导的细胞能量代谢通路在抗肺纤维化中起重要作用。脂联素(ADPN)是一种重要的脂肪细胞因子,参与机体能量代谢调节,被报道具有显著的抗纤维化作用。JXD是具有全新化学结构的AMPK激动剂。本论文拟在观察内源性物质ADPN与外源性小分子JXD抗肺纤维化作用的基础上,探讨其机制是否与激活AMPK介导的细胞能量代谢通路相关。研究内容主要包括以下几个方面:(1)ADPN抗肺纤维化作用及机制研究:(1)ADPN抗博来霉素诱导的小鼠肺纤维化作用。以博来霉素(BLM)诱导小鼠成功建立肺纤维化模型,肺组织中p-AMPK表达水平显著降低,TGF-β1含量显著增加。外源性ADPN能显著改善BLM诱导的C57BL/6小鼠体重降低,肺功能损害以及肺泡炎症及肺脏纤维化的病理改变;显著抑制p-AMPK表达水平降低及TGF-β1含量增加。ADPN基因敲除能显著加重BLM诱导的C57BL/6小鼠肺纤维化的改变,同时显著促进BLM诱导p-AMPK降低及TGF-β1增加。AMPK抑制剂Compound C能逆转外源性ADPN对BLM诱导的C57BL/6小鼠肺纤维化保护作用。结果表明ADPN可能通过AMPK介导发挥抗小鼠肺纤维化作用。(2)ADPN对TGF-β1诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)体外细胞增殖模型的影响。在体外TGF-β1诱导的肺成纤维细胞增殖模型中,ADPN能显著抑制细胞增殖,增加p-AMPK蛋白表达,降低结缔组织生长因子(CTGF)表达,减少α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和胶原蛋白的生成。同时,AMPK抑制剂Compound C能拮抗外源性ADPN对TGF-β1诱导的细胞增殖的抑制作用。结果提示,ADPN可能通过激活AMPK磷酸化抑制TGF-β1/CTGF通路减少细胞增殖和细胞外基质(ECM)生成。(2)小分子化合物JXD抗肺纤维化作用及机制研究:(1)小分子化合物JXD抗博来霉素诱导的小鼠肺纤维化作用。JXD低、中、高剂量及吡非尼酮均能明显的改善博来霉素诱导的肺纤维化小鼠肺功能,缓解肺泡炎症及纤维化程度,增高p-AMPK活性,显著降低TGF-β1含量,JXD具有明显的剂量相关性。给予AMPK抑制剂Compound C后,JXD的上述作用被逆转。结果表明JXD可能通过AMPK介导发挥抗小鼠肺纤维化作用。(2)小分子化合物JXD对TGF-β1诱导人肺成纤维细胞HLF-1体外细胞增殖模型的影响。JXD低、中、高浓度及吡非尼酮均能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-1细胞增殖、活化,显著抑制胶原蛋白含量、抑制α-SMA及CTGF的表达,明显促进AMPK磷酸化水平。给予AMPK抑制剂Compound C后,JXD的上述作用被逆转。结果表明JXD可能通过激活AMPK磷酸化抑制TGF-β1/CTGF通路减少细胞增殖和ECM生成。结果表明,脂联素和小分子化合物JXD均具有显著的抗肺纤维化作用,其作用机制与激活AMPK,抑制TGF-β1/CTGF通路,减少肺成纤维细胞增殖及胶原蛋白生成有关。本研究有望为开发治疗肺纤维化的药物提供新的思路。