【摘 要】
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目的:本研究通过检测芍药苷(paeoniflorin,PF)对人白血病耐阿霉素(admiamycin,ADR)细胞株K562/ADR的耐药性、胞内阿霉素的荧光强度及耐药相关蛋白表达的影响,探究芍药苷对K56
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目的:本研究通过检测芍药苷(paeoniflorin,PF)对人白血病耐阿霉素(admiamycin,ADR)细胞株K562/ADR的耐药性、胞内阿霉素的荧光强度及耐药相关蛋白表达的影响,探究芍药苷对K562/ADR细胞多药耐药的作用及分子机制,为芍药苷的抗白血病作用提供理论依据。方法:K562、K562/ADR细胞中加入不同浓度的ADR(K562细胞:0.2、0.4、0.8、1.6μg/mL,K562/ADR 细胞:16、32、64、128μg/mL),CCK-8 法检测K562/ADR细胞的耐药倍数;不同质量浓度(2～16μM)的芍药苷作用于K562/ADR细胞24h后,CCK-8法检测各浓度下细胞抑制率;K562/ADR细胞中单独加入ADR,或加入ADR联合不同浓度芍药苷(2μM、4μM),CCK-8法检测芍药苷对细胞活力的影响;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测芍药苷对胞内ADR平均荧光强度变化的影响;蛋白质印记(western blot,WB)法检测多药耐药相关蛋白 1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)、p38、磷酸化 p38(phosphorylated p38,p-p38)表达变化。结果:K562/ADR细胞对ADR的耐药倍数为32.91倍,表明与敏感K562细胞相比,耐药株K562/ADR细胞对ADR有稳定的耐药性;不同浓度的芍药苷(2～16μM)处理K562/ADR细胞24h后,K562/ADR细胞生长受到抑制,且呈计量依赖性;芍药苷无毒剂量下(2μM、4μM)可明显增强ADR对K562/ADR细胞的细胞毒性,抑制细胞生长,使胞内ADR平均荧光强度明显升高。不同浓度芍药苷处理后,K562/ADR细胞中MRP1、p-p38蛋白的表达水平均明显下调,而p38蛋白表达水平未见明显改变。结论:芍药苷体外可有效逆转K562/ADR细胞多药耐药,其作用机制与抑制P38 MAPK信号通路的活化,下调MRP1蛋白表达,增加胞内药物蓄积浓度有关。
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