马齿苋提取物对豆蚜的毒杀活性成分提取与含量测定

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豆蚜(Cowpea aphid)作为豆科一类作物的主要害虫,在吸取植物营养时还会传播多种植物病毒,对豆科一类的农作物产量具有很大的影响。马齿苋(Portulaca oleracea L.)在全国各地分布极广,整株都可作药用,尽管其在中草药方面已有诸多报道,但在农药害虫防治方面仍缺少系统的研究。为了更充分地利用这一野生植物资源,本试验研究了马齿苋对豆蚜毒杀活性成分的提取、分离方法,并对毒杀活性成分含量进行了测定,以期为开发以马齿苋为原料的植物性杀虫剂提供理论依据。主要研究结果如下:1.马齿苋杀蚜活性成分提取溶剂的确定(1)马齿苋几种不同溶剂提取物对豆蚜都有一定的毒杀作用,随着时间的延长,死亡率升高。杀蚜活性依次为:石油醚>乙醇>三氯甲烷>乙酸乙酯>水;48h后,乙醇与石油醚提取物杀蚜效果无明显差异,但与其他溶剂杀蚜活性间存在显著差异(p<0.05)。(2)马齿苋的石油醚提取物和乙醇提取物对豆蚜都有较高的毒杀活性,且随着浓度的升高而增大。石油醚的LC50=48.38mg(生药)/m L,乙醇的LC50=45.79mg/m L。乙醇与石油醚提取物的杀蚜活性相近,但极性化合物组成差异很大,可能提取物中残留的有机溶剂对实验结果有一定影响,综合考虑杀蚜效果与提取溶剂的安全性,选取乙醇作为马齿苋的最佳提取溶剂。(3)不同溶剂提取物的HPLC分析表明,其色谱峰组成具有一定的相似性,但多个色谱峰高具有显著差异。乙醇提取物中含有极性及弱极性的多种化学成分,相较于其他溶剂提取效果更好,且70%乙醇提取效果最佳。2.马齿苋不同乙醇洗脱物的杀蚜活性比较(1)800g马齿苋制得不同乙醇洗脱物干粉共9.86g,总得率为1.23%;各组分干粉质量分别为20%乙醇洗脱物4.23g,得率0.53%,;40%乙醇洗脱物4.43g,得率0.55%;60%乙醇洗脱物1.20g,得率0.15%;80%乙醇洗脱物经冷冻干燥后未获得干粉。(2)不同乙醇洗脱物对豆蚜都有一定的毒杀作用,且随着浓度的升高而增大。混合洗脱物的LC50=0.75mg(干粉)/m L,40%乙醇洗脱物LC50=0.89mg/m L。杀蚜活性分别为:混合洗脱物>40%乙醇洗脱物>20%乙醇洗脱物>60%乙醇洗脱物。(3)不同乙醇洗脱物的HPLC分析表明,其色谱峰组成具有一定的相似性,但多个色谱峰高具有显著差异。40%乙醇洗脱物的色谱峰明显高于混合洗脱物,但其毒杀活性相近,推测混合洗脱物中的毒杀活性可能受到多种物质的协同作用。3.马齿苋杀蚜活性成分含量测定及杀虫效果相关性分析(1)马齿苋不同乙醇洗脱物均含有黄酮类、多酚类和萜类化合物。(2)20%乙醇洗脱物、40%乙醇洗脱物、60%乙醇洗脱物、混合洗脱物中的黄酮含量分别为19.48%、29.58%、9.78%、22.57%;多酚含量分别为19.81%、24.16%、11.03%、23.06%。(3)马齿苋不同浓度乙醇洗脱物黄酮含量、多酚含量与杀蚜活性的相关系数分别为0.901、0.947,且随着黄酮与多酚含量的升高,杀蚜活性也在逐步增强。多酚含量与杀蚜活性的相关系数高于黄酮含量,推测杀蚜活性成分除了黄酮成分外还包括一些非黄酮类的多酚类成分。
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