随着食品工业的不断发展,人们的消费观念也在不断发生变化,具有天然活性的保健品日益成为人们研究的重点,黄酮类化合物因其纯天然、活性高,已得到越来越多人的关注[1]。基于此,本文从含羞草种子出发,一方面对其黄酮类化合物的提取方法[2]进行了探究,另一方面建立了黄酮类化合物的分离纯化方法[3],同时利用HPLC对常见的四种黄酮类化合物进行了分离,本文共分为四章,其主要内容如下:第一章对现有黄酮类化合物的提取方法以及分离方法进行概述,同时阐述了本文的选题背景,研究内容及创新点。第二章建立了含羞草种子中总黄酮的超声波提取工艺[4]。探究了溶剂组成、配料比、超声时间、超声温度及浸泡时间对黄酮提取量的影响,同时选用芦丁作为对照品,通过吸光度的测定,来计算总黄酮的含量。在单因素实验的基础上,进行正交试验,最终确定了最佳提取方法:选用8倍量60%乙醇为提取剂,在40℃-44℃下超声50 min,此方法简单可行,黄酮提取率较高。第三章建立了利用大孔吸附树脂Diaion HP-20分离纯化含羞草种子中黄酮类化合物的方法[5]。在已有纯化工艺条件下[6]对洗脱剂体积分数、洗脱剂用量进行了研究,并用HPLC进行跟踪监测,得出洗脱剂体积分数为100%乙醇,洗脱剂体积为3BV时,洗脱液浓度最高,可能含有的黄酮量最高;借助于制备型高效液相色谱,在最佳分离条件下,分别将样品进行收集,并进行结构检测。第四章建立了常见四种黄酮类化合物的HPLC分离方法。通过优化影响分离的条件参数,得出最佳分离条件,并对四种物质的最低检出限进行检测,分别为:240μg/L、30.0μg/L、17.5μg/L、9.12μg/L,且回收率均在86.4%~110.6%之间。该方法灵敏度高,分析周期短,对黄酮类物质的定性检测具有很大的参考价值。