维生素B6(VB6)是一类化合物的总称。近年来研究发现VB6在植物体内发挥抗逆作用。烟草作为模式植物其体内VB6的存在形态还未见报道。本研究采用高效液相色谱荧光检测技术对烟草体内VB6的存在形态进行了分析。结果表示：　　 土壤栽培烟草叶、茎和根中VB6的含量依次为2.9、1.7、3.0μg/g鲜重；组培烟草叶片的VB6 含量为3.9μg/g鲜重，构成比为磷酸吡哆胺(PMP)7％、吡哆胺(PM)14％、磷酸吡哆醛(PLP)19％、吡哆醛(PL)29％、吡哆醇(PN)30％；组培烟草在连续3周的检测过程中，PLP和PL含量下降、PN含量上升，VB6总量保持相对稳定。研究结果有助于以烟草为材料，进一步开展植物体内VB6 代谢机制和特殊生理机制的研究。　　 本文通过构建组织培养模型，在组织水平上探讨植物体内的代谢机制。采取在MS 培养基上外源添加VB6(PM，PL，PN)干涉植物的生理环境，采用应答分析的方式，系统分析VB6的存在形态。取烟草叶片组织加液氮研磨加提取液得到粗酶液，测定相关代谢酶的酶活，分析VB6 相关代谢酶酶活变化为应答分析提供依据。外源添加PM后叶片中PM 增加到54 倍，PL增加到7.7倍，PN 增加到11倍；外源添加PL后叶片组织中PL增加到12倍，PN增加到28倍，PM增加到9倍；外源添加PN后叶片中PN增加到40倍，PM增加到4倍。以上三种不同处理并未引起PMP、PLP量得变化。三种处理VB6总量都显著变化。　　 为了分析植物吸收VB6的方式，通过在MS培养基中设置不同的梯度，分析添加量和吸收量的关系，发现烟草吸收VB6的方式为自由扩散。　　 本实验摸索出烟草VB6体外代谢相关代谢酶的最适反应条件，发现PL激酶最适pH5.5反应时间3h，PNP/PMP氧化酶最适pH9.0反应时间2h，PLP-磷酸酶最适pH5.5反应时间10min，PL还原酶最适pH7.0反应时间2h，PM-丙酮酸转氨酶最适pH11，反应时间2h。反应温度都为37℃。　　 在上述最适的酶反应条件下测得各酶的酶活分别为PL激酶0.03±0.01nmol/min/g鲜重，PNP/PMP氧化酶0.12±0.01nmol/min/g鲜重，PLP-磷酸酶179.71±41.46nmol/min/g鲜重，PL还原酶0.78±0.04nmol/min/g鲜重，PM-丙酮酸转氨酶2.14±0.15nmol/min/g鲜重。VB6进入植物体内，引起体内VB6量的迅速增加外，同时也引起了相关酶活性的变化，三种处理都会引起PLP-磷酸酶活性的增加；PL激酶活性的降低，PNP/PMP氧化酶的增加，PL还原酶活性的增加仅见于PL添加组。PM-丙酮酸转氨酶都有所增加。