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长茎葡萄蕨藻(Caulerpa lentillifera)是一种可食用大型经济绿藻,具有很高的营养价值。硒作为人体必需的微量元素,对人体的健康有很大的作用。如果能增加长茎葡萄蕨藻的硒含量,提高其经济价值,对于藻体生产和人体的健康都有着重要的意义。目前强化食物中的硒含量以补充人体硒的摄取是目前功能食品研究热点之一,而大型经济海藻在硒元素的富集方面只是近几年才引起关注,因此,本研究通过在长茎葡萄蕨藻的培养液中添加亚硒酸钠(Na2SeO3),对藻体的富硒能力及相关因子对其富硒量的影响进行初步探索,为后续培养出富硒的功能海藻食品提供一定的理论依据。主要的研究结果如下:1、不同硒浓度对长茎葡萄蕨藻富硒的影响。结果表明,亚硒酸钠的添加量在0-8mg/L范围内,在7天的培养时间里,随着硒浓度的增加,藻体硒含量(干重)从17.0μg/g增加到50.10μg/g,且各组间均有显著性差异(P<0.05),2mg/L时达到11.7μg/g;硒浓度大于2 mg/L时,显著抑制藻体的生长(P<0.05),叶绿素a和叶绿素b含量显著性降低(P<0.05),硒浓度低于2 mg/L时,藻体的生长、叶绿素a和叶绿素b含量均无显著性差异。对于类胡萝卜素含量而言各,实验组间无明显变化。在低浓度和中浓度硒条件下,长茎葡萄蕨藻中T-SOD、GSH-PX和CAT的酶活性增加;当硒浓度增加到高浓度(4mg/L)时,藻体内的ROS增加,使得藻体GSH-PX和SOD酶的活性再次升高,但是CAT的活性有所下降。2、不同添加方式对长茎葡萄蕨藻富硒的影响。结果表明,在一次性添加硒的方式下,在5天的培养时间里,长茎葡萄蕨藻硒的富集量最高,能达到18.58μg/g,与其他实验组相比较显著升高(P<0.05);其次是在后三天分次添加的方式,富硒量达到16.30μg/g,与其他实验组相比较差异显著(P<0.05);最后是等量添加、等梯度添加和低到高水平添加三种添加方式,这三种方式的富硒结果间没有显著性。3、不同富集时间下长茎葡萄蕨藻富硒量变化。结果表明,在2mg/L的亚硒酸钠条件下培养,藻体的富硒量随着时间延长而出现上升的趋势,在前16 h内增长最快,在16 h达到7.77 μg/g,之后一段时间藻体硒的富集量比较平稳,总硒含量保持在8.00 μg/g左右。4、温度、光照和N/P比例对长茎葡萄蕨藻富硒量的影响。结果表明,在硒浓度2 mg/L的培养下,在7天的培养时间里,藻体最适的生长条件是温度28℃、照度2000 lx、N/P比10:1;藻体的最优富硒条件是温度24℃、照度2000 lx、N/P比8:1。5、不同光质对长茎葡萄蕨藻富硒的影响。结果表明,在硒浓度2mg/L的培养下,在7天的培养时间里,在红光条件下生长最好,特定生长率最高;在蓝光条件下,实验藻体的富硒量最高,达到12.44 μg/g干重;叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量红光、蓝光和白光实验组中较高;T-AOC在红光和蓝光实验组中较高,与黄光实验组相比差异显著(P<0.05);T-SOD的活性在红光、蓝光和白光实验组较高,与绿光实验组相比较显著性升高(P<0.05);在蓝光实验组总蛋白含量最高,与其他实验组相比较显著性升高(P<0.05);可溶性糖在红光和蓝光实验组的含量较高,与黄光和绿光实验组比较显著性升高(P<0.05);维生素C在红光和白光实验中的含量较高,两组间无显著性差异,与其他实验组相比较显著性升高(P<0.05)。6、不同锌浓度对长茎葡萄蕨藻富锌量的影响。结果表明,在7天的培养时间里,随着锌浓度的增加,长茎葡萄蕨藻的特定生长率呈下降趋势;培养液中硫酸锌(ZnSO4·7H2O)的添加量在0-8mg/L范围内,藻体的富锌量与锌浓度呈线性上升关系,锌富集量(干重)从31.82μg/g增加到2131.35μg/g,提高近70倍,且各组间均有显著性差异(P<0.05);在对照组中(0mg/L)叶绿素a的含量最高,与其他实验组相比较差异显著(P<0.05);随着锌浓度的升高,叶绿素b含量呈下降的趋势,且各组间的差异具有显著性(P<0.05);对于类胡萝卜素含量而言是呈先上升后下降的趋势,在8mg/L实验组中含量最低,与其他实验组(除对照组)相比较差异显著(P<0.05)。7、锌硒交互作用对长茎葡萄蕨藻锌硒富集的影响。结果表明,在7天的培养时间里,长茎葡萄蕨藻在对照组(Zn0Se0)中,藻体的特定生长率最高,随着锌和硒浓度的升高,长茎葡萄蕨藻的生长逐渐受到抑制;长茎葡萄蕨藻在对照组(Zn0Se0)中,藻体叶绿素a和叶绿素b的含量最高,与其他实验组性比显著性升高(P<0.05),随着锌硒浓度的升高,叶绿素a和叶绿素b的含量呈下降的趋势,而类胡萝卜素的含量在对照组(Zn0Se0)中最低,随着锌硒浓度的升高,类胡萝卜素的含量呈上升的趋势。在锌硒交互作用下,随着锌浓度的升高,藻体锌含量不断升高;高浓度锌实验组(2mg/L)中藻体锌含量与低、中实验组相比较显著性升高(P<0.05),在高浓度锌条件下,随着硒浓度的升高,藻体对锌的富集能力得到增强。在低、中、高浓度硒实验组中,随着锌浓度的升高,藻体硒含量呈上升趋势;在低浓度(1 mg/L)硒条件下,添加高浓度的锌,使得长茎葡萄蕨藻的富硒量有所提高;在中浓度(2mg/L)硒条件下,添加不同浓度锌均会提高藻体的富硒量;在高浓度(4mg/L)硒条件下,添加锌对藻体吸收硒的作用效果不明显。