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背景:为了保留患者生育功能或避免高风险手术,孕激素治疗常作为高分化子宫内膜样癌的保守治疗方式,然而孕激素抵抗已成为目前保守治疗的主要临床问题。目的:证实PAX2可以通过调控PR-B影响子宫内膜样癌的孕激素疗效,进一步探讨子宫内膜样癌的孕激素抵抗机制,为提高早期子宫内膜样癌的药物疗效,保留患者的生殖内分泌功能提供新的分子靶标。方法:第一部分:1.qRT-PCR、Western blot检测5个子宫内膜样细胞株中PAX2的本底表达量;2.过表达/干扰PAX2后用孕激素处理,检测肿瘤增殖、侵袭迁移能力(CCK8、平板克隆、Transwell、划痕实验)。第二部分:1.过表达/干扰PAX2后用孕激素处理,Western blot检测AKT/mTOR通路蛋白表达量;2.COIP鉴定PAX2与PR-B是否有相互作用;3.过表达PAX2后用孕激素处理,CHIP测序寻找PR-B下游差异基因。结果:1.qRT-PCR、Western blot 结果显示,PAX2 在 ISH、KLE 和 HEC 细胞株中相对低表达,在RL和JEC细胞株中相对高表达。2.CCK8、平板克隆、Transwell、划痕实验结果显示,PAX2过表达联合P4处理可有效抑制ISH和KLE细胞株的增殖能力和侵袭迁移能力(P<0.01)。3.Western blot结果显示,在ISH和KLE细胞株中,过表达PAX2或P4处理都能抑制AKT/mTOR通路,但过表达PAX2联合P4处理对AKT/mTOR通路抑制作用更明显;过表达PAX2能促进两个细胞株中PR-B的表达,但在ISH细胞株中,AKT/mTOR通路促进剂(IGF)作用后,过表达PAX2组的PR-B表达量增加受阻。4.外源性免疫共沉淀结果显示,在ISH细胞株中,无论是否有孕激素P4的存在,PAX2都可以与孕激素受体PR-B相互结合。5.chip-seq结果显示,在ISH细胞株中,PAX2可以降低PR-B下游基因ERBB2的表达;GEO数据显示,ERBB2在EEC组织中较癌旁正常组织高表达。结论:1.PAX2可通过抑制AKT/mTOR通路间接促进PR-B的表达,从而增强EEC的孕激素疗效;2.PAX2也可通过与PR-B相互作用,并调控PR-B下游基因的表达,从而增强EEC对孕激素的敏感性。