【摘 要】
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目的:建立小鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,观察小鼠心肌细胞缺氧/复氧模型中磷脂酰肌醇3-激酶（Phosphatidylinositol 3-kinas,PI3K）、蛋白激酶B（Protein Kinase B,AKT）及caspase-3的表达情况,探索α-1抗胰蛋白酶（α-1 antitrypsin,A1AT）对缺氧/复氧小鼠心肌细胞PI3K/AKT的影响。方法:实验分组:对照组（Control组）
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目的:建立小鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,观察小鼠心肌细胞缺氧/复氧模型中磷脂酰肌醇3-激酶（Phosphatidylinositol 3-kinas,PI3K）、蛋白激酶B（Protein Kinase B,AKT）及caspase-3的表达情况,探索α-1抗胰蛋白酶（α-1 antitrypsin,A1AT）对缺氧/复氧小鼠心肌细胞PI3K/AKT的影响。方法:实验分组:对照组（Control组）、缺氧/复氧组（H/R组）、α-1抗胰蛋白酶干预组（A1AT组）。体外采用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）诱导的缺氧培养基培养小鼠心肌细胞缺氧后复氧,建立缺氧/复氧模型,并筛选A1AT最佳干预浓度。利用CCK-8检测细胞功能,利用光学显微镜观察细胞形态改变,利用免疫荧光及Western Blot检测细胞PI3K、AKT及caspase-3的表达。并用SPSS 22.0进行数据统计。结果:1、Na2S2O4诱导心肌细胞缺氧的最佳时间为60min,最佳诱导缺氧浓度4mmol/L,A1AT最佳干预浓度为20umol/L,最佳干预时间为4小时。2、Control组小鼠心肌细胞排列整齐,紧密,为梭形,形态规则。H/R组小鼠心肌细胞排列不规则,较Control组稀疏,细胞肥大,部分呈椭圆形或不规则形。A1AT组小鼠心肌细胞排列较H/R组规则,较紧密,肥大的心肌细胞明显减少。3、免疫荧光检测发现H/R组PI3K、AKT、caspase-3分子表达强阳性,与Control组及A1AT组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。4、WB检测发现H/R组PI3K、AKT、caspase-3蛋白表达上调,与Control组及A1AT组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.心肌细胞缺氧/复氧时PI3K、AKT及caspase-3表达上调。2.A1AT能够抑制缺氧/复氧PI3K、AKT及caspase-3蛋白的表达,减少心肌细胞缺氧/复氧损伤。
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